詳細(xì)介紹
兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IFI44 干擾素誘導(dǎo)蛋白44抗體 規(guī)格 0.2ml | Human Cyclin-D2 ELISA Kit 人細(xì)胞周期素D2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
Anti-Nogo-A/NEP /FITC 熒光素標(biāo)記軸索過度生長(zhǎng)抑制因子-A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | cAMP ELISA Kit 大鼠環(huán)0酸腺苷Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
Rhesus antibody Rh Phospho-MSK1 (Ser212) 0酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-LAIR-1/CD305/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
AQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白5Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | CDCA7L: 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體 0.2ml |
Anti-TSARG6/DNAJB13 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | CM-H036人小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
HuT 78細(xì)胞,人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 小鼠漿細(xì)胞瘤,MPC-11細(xì)胞 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基MEpiCM-prf | TE 115.T細(xì)胞,人軟組織纖維瘤細(xì)胞 SV40永生化的人胚腎上皮細(xì)胞,293T細(xì)胞 腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
FGF1: 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml | GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細(xì)胞病毒 HCMV gB ECD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
Human Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit 人過敏毒素/補(bǔ)體片斷4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | Hep G2(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0442SK-NEP-1(人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人胚胎肌肉組織來源細(xì)胞;CCC-HSM-2 |
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T | TNF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A / Cachectin 蛋白 |
Anti-HCV-HCBP1/ACY-3 /FITC 熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒核心蛋白結(jié)合蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 人纖維肉瘤細(xì)胞;HT-1080 |
Rhesus antibody Rh APOC4/Apolipoprotein CIV 載脂蛋白C4抗體 規(guī)格 0.2ml | 兔原代股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
PDE1C Others Human 人 PDE1C 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
Gibco 12556-023 TM-C100 Supplem e,liquid 75ml | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6 |