化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
Kasumi-1細(xì)胞，人急性成髓細(xì)胞白血病 615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株,L7912細(xì)胞 超氧化物歧化酶分析試劑盒SOD | Rhesus antibody Rh ABCG8 三0酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體 規(guī)格 0.2ml |
CKLFSF2 isoform 1： 趨化素樣因子超家族成員2亞型1抗體 0.2ml | Anti-HIV-1 ENV(gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
phospho-HOMER3 (Thr36)： 0酸化HOMER3蛋白抗體 0.1ml | Anti-AR(phospho Ser213/Ser791)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化雄激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Spindly： 亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體 0.2ml | HAI-1： 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物抑制劑抗體 0.1ml |
Anti-CD147/EMMPRIN/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | OXR(Human Orexin receptor) ELISA Kit 人食欲素受體 96T |
iNOS： 合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型) 0.1ml | 子宮平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
HFL-I細(xì)胞，人胚肺成纖維細(xì)胞 鼠肌原細(xì)胞,C2C12細(xì)胞 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | HSAEpC Pellet 人小氣道上皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人膀胱平滑肌細(xì)胞cDNAHBdSMC cDNA |
Anti-Pdx1/FITC 熒光素標(biāo)記胰十二指腸同源異型盒基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 人前列腺成纖維細(xì)胞(HPrF)(5×105) 人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Human |
Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) 0酸化受體結(jié)合絲蘇激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | 人胚腎細(xì)胞;293FT 人腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人胚胎，皮膚，肌肉;M-22 | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6 |
IGF1R： 胰島素樣生長(zhǎng)因子I受體抗體 0.1ml | CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml | 兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
SP2/0細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞 CTLL-2(T細(xì)胞) 人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL1 | B2M Others Cynomolgus 食蟹猴 B2M / Beta-2-microglobulin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
SPN Others Mouse 小鼠 SPN / CD43 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256 |
1.使用兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響兔原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
化工儀器網(wǎng)