詳細(xì)介紹
兔原代肝卵圓細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔原代肝卵圓細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代肝卵圓細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于兔原代肝卵圓細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代肝卵圓細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響兔原代肝卵圓細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | Anti-MLK3 /FITC 熒光素標(biāo)記絲/蘇蛋白激酶MLK3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Anti-OAS1 寡腺苷酸合成酶-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml | ATA(Human Angiotensinase A) ELISA Kit 人血管緊張肽酶A 96T |
Rhesus antibody Rh BRRN1/CAPH 染色體相關(guān)蛋白H抗體 規(guī)格 0.2ml | IL-28(human Interleukin 28) ELISA Kit 人白介素28 96T |
F1 operon positive regulatory protein: 肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端) 0.2ml | Rhesus antibody Rh CCDC112/MBC1 膀胱癌突變蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml |
HBsAb(立可讀) 乙型肝炎表面抗體 96T | Profilin 2: 前纖維蛋白2抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Ghrelin 28 腦腸肽抗體 規(guī)格 0.1ml | 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B 人肝癌細(xì)胞,SK-HEP-1細(xì)胞 95-D(高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞) |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml | CL-0058CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr212) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | BT474 人導(dǎo)管癌細(xì)胞 |
Cpn-Ab(Human Chlamydia pneumoniae antibody) ELISA Kit 人肺炎衣原體抗體 96T | B95-8 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞 |
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Rhesus antibody Rh CENPT 著絲粒蛋白T抗體 規(guī)格 0.2ml | Molt-4(人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Anti-PS-1(CT)/FITC 熒光素標(biāo)記早老素蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 兔原代肝卵圓細(xì)胞專用培養(yǎng)基敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21 |
CCL17 Protein Mouse 重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白 | RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
EJ 人膀胱癌細(xì)胞 | 豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5 大鼠肝細(xì)胞,BRL 3A細(xì)胞 NBLE細(xì)胞,新生牛眼晶體上皮細(xì)胞 |