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詳細(xì)介紹
兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代間質(zhì)細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；-20℃，避光，保存6個月。
1）復(fù)蘇兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-00063T3-L1(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albino | Rhesus antibody Rh RAB40B RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體 規(guī)格 0.2ml |
AHA(Human anti-Histone antibody) ELISA Kit 人抗組蛋白抗體 96T | RNF169： 環(huán)指蛋白169抗體 0.2ml |
Anti-FSH/FITC 熒光素標(biāo)記促卵泡刺激素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | MBD1： 甲基化CpG結(jié)合蛋白抗體 0.1ml |
間皮素抗體 Anti-MSLN 0.1ml | Anti-CT-1/CTF1/FITC 熒光素標(biāo)記心肌營養(yǎng)素1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
MNS1： 減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh KLHL22 Kelch樣蛋白22抗體 規(guī)格 0.2ml |
CXCR3 ELISA Kit 大鼠CXC趨化因子受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | 人骨肉瘤細(xì)胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] |
家貓皮膚細(xì)胞;FCA-S1 胚肺成纖維細(xì)胞，HFL-I細(xì)胞 IEC-6細(xì)胞，大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 | FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗豚鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
mu Opioid receptor： μ-型受體抗體 0.1ml | Calu-6(人肺退行性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞HPrMEC |
HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞 | J82(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J |
Rabbit Anti-IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml | 兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基人骨肉瘤細(xì)胞;HOS 大鼠支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
RL95-2(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 CGB5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | TNFRSF18 Others Rat 大鼠 GI / TNFRSF18 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SW1116人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SW1116 human colon adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞 |
1.使用兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會有少量絮狀物析出，不影響兔原代肝間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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