詳細(xì)介紹
兔原代附睪上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔原代附睪上皮細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代附睪上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代附睪上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml) | Gremlin: 骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體 0.1ml |
AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 人αL巖藻糖苷酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | C1orf167: 1號染色體開放閱讀框167抗體 0.2ml |
Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2) β-抑制蛋白1/2抗原 0.5mg | phospho-AKT1/3 (Tyr473): 0酸化蛋白激酶B抗體 0.1ml |
FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg | GFP 綠色熒光蛋白 0.5mg |
AMIGO2: 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 0.2ml | Anti-Laminin Beta 1 層粘連蛋白β1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
AT ELISA Kit 大鼠抗酶 96T | LRP11 Others Human 人 LRP11 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
原代肝實質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml | 大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-1 |
表皮膜蛋白1抗體 Anti-Emp1 0.2ml | 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
BRCA1: 癌易感基因1抗體 0.1ml | 人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞RNAHVT miRNA5 μg |
犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞,BALB/3T3細(xì)胞 RYTF細(xì)胞,兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞 | CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Rarres2/TIG2/Chemerin(Retinoic acid receptor responder protein 2)酸受體應(yīng)答蛋白2抗原 0.5mg | 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1 大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
Anti-IL-5/FITC 熒光素標(biāo)記白介素5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 兔原代附睪上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21 |
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) | 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6 |
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1 | 小鼠淋巴瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
1.使用兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響兔原代附睪上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。