詳細(xì)介紹
狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子抗體 | 酸化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅) |
纖維母細(xì)胞生長因子受體底物3抗體 | 親核素β1抗體 |
視網(wǎng)膜色素變性蛋白1抗體 | PC-2細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞 人皮膚癌細(xì)胞系,HS-4細(xì)胞 小鼠黑色素瘤瘤株;B16 |
長鏈脂肪酸?;?span>A水解酶抗體 | 造血細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白抗體 |
G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 | 熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體 |
小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1 | IL17RB Others Human 人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
土抗體 | 小型豬腎細(xì)胞;MPK 畸胎癌細(xì)胞,P19細(xì)胞 W256細(xì)胞,Walker氏癌肉瘤256瘤株 |
多功能DNA修復(fù)酶抗體 | FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
6號染色體開放閱讀框154抗體 | 人骨肉瘤細(xì)胞;HOS |
干擾素α16抗體 | 前列腺上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體 | 小鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
MN-s, 小鼠紋狀體元 Mouse | 狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基ZR75-30細(xì)胞,人癌細(xì)胞 129小鼠ES細(xì)胞,E14細(xì)胞 HNE2, 人鼻咽癌細(xì)胞系 |
HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0393NCI-H209(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO | 人支氣管平滑肌細(xì)胞cDNAHBSMC cDNA |
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO | 人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S |
1.使用狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響狗原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。