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詳細(xì)介紹
大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
免疫球蛋白超家族成員21抗體 | 白細(xì)胞介素18結(jié)合蛋白抗體 |
細(xì)胞粘附分子4抗體 | 補(bǔ)體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白10抗體 |
C-反應(yīng)蛋白抗體 | 大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J 大細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H460[H460]細(xì)胞 VX2細(xì)胞，兔的肝細(xì)胞 |
芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌激素合成酶抗體 | HEATR4蛋白抗體 |
離子通道蛋白Kv3.4抗體 | 著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體 |
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D3 IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL | MKN45(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白2抗體 | CL-0406NCI-H838(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
酸化上皮酪激酶/乳腺癌激酶10抗體 | U-87 MG(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3抗體 | 3T3L1細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(前脂肪) 人癌細(xì)胞,ER-30細(xì)胞 體外管腔形成分析試劑盒IVTFA |
Kelch樣蛋白26抗體 | HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系 二氫缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞，CHOdhfr細(xì)胞 CCD-1095Sk(皮膚細(xì)胞) |
通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體 | JEG細(xì)胞，人絨毛膜癌 大鼠肝細(xì)胞,IAR20細(xì)胞 人心臟成纖維細(xì)胞-心房HCF-aa |
6T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T |
Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌耐藥細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022 | HUVEC single donor Pellet 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 球狀少突細(xì)胞培養(yǎng)基OsM |
ACVRL1 Others Mouse 小鼠 ALK-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
1.使用大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞的優(yōu)良使用效果，不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會有少量絮狀物析出，不影響大鼠原代結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞正常使用。
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