大鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 Ca Ski(人上皮細(xì)胞) MDA-MB-435S 人癌細(xì)胞 1ml/T75 Hce-8693 人盲腸腺癌細(xì)胞（未分化） A549-luc 人肺癌熒光素酶細(xì)胞 小鼠原代外周血單核細(xì)胞

大鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腹膜組織；腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜，主要由間皮細(xì)胞和間質(zhì)（結(jié)締組織、纖維、毛細(xì)血管、淋巴管）構(gòu)成，藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官，能分泌黏液潤濕臟器的表面，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連；腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果。腹膜（peritoneum）為全身面積最大、配布最復(fù)雜的漿膜，由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成，薄而光滑，呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層；覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行，共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液，在臟器活動時可減少摩擦。腹膜的主要生理功能：①分泌功能；②吸收功能；③再生能力；④防御功能；⑤調(diào)理功能。臟、壁腹膜都有豐富的毛細(xì)血管，毛細(xì)血管上有不同的孔徑；腹膜的毛細(xì)血管和毛細(xì)血管后靜脈是進(jìn)行溶質(zhì)交換的主要場所。

產(chǎn)品名稱：大鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：腹膜

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化法結(jié)合化學(xué)試劑抑制法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒

Rat ai IgE receptor aibody ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒

Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2試劑盒人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)試劑盒

植物氨含量熒光定量試劑盒20次

Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒

豬(EPI)ELISA 試劑盒

Human kallikrein 11 (KLK 11) ELISA Kit 人11(KLK 11)試劑盒

GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAkit 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforANG(Humanangiostatin)ELISAKit人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白

血液(CO2)濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒

致病性大腸桿菌(EPEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

單增李斯特菌(LM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

球菌(SA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

甲型副氏菌(SPA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

CD5重組大鼠 CD5 蛋白  Protein

FLG(filaggrin 0.5mgFLG(filaggrin)peptide 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原

CD164重組人 CD164 / Endolyn 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ADM Protein Human 重組人 ADM / Adrenomedullin 蛋白

FGFR1 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 (His 標(biāo)簽)

AML-193(人急性單核細(xì)胞白血病單核細(xì)胞)  人神經(jīng)細(xì)胞HN  正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E 胸膜細(xì)胞瘤，SMC-1細(xì)胞 RIN-m細(xì)胞，褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞  SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人細(xì)胞裂解液 豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞永生化細(xì)胞 人原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮原代細(xì)胞Fut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1 0.5mgFut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1) 階段特異性胚胎表面抗原-1抗原

AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B2/A1) Heterotrimer 蛋白

CD2重組大鼠 CD2 蛋白  Protein

ICAM2 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白

PARK7重組人 PARK7 / DJ-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein