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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠口腔上皮細胞先蛋白酶消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠口腔上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠口腔上皮原代細胞 | 組織來源 | 口腔黏膜組織 |
英文名稱 | Rat Oral Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7676 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠口腔上皮細胞分離自口腔黏膜組織；口腔上皮細胞是一種上皮細胞，呈扁平、多邊形，形狀不規(guī)則?？谇桓鞅诙加叙つじ采w，口腔上皮細胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部。上皮的垂直切面上，細胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細胞，部分子細胞向淺層移動。基底層以上是數(shù)層多邊形細胞，再上為幾層梭形或扁平細胞。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀，基底層細胞能不斷分裂增生，以補充表層衰老或損傷脫落的細胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的毛細血管，有利于復(fù)層扁平上皮的營養(yǎng)。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒
Rat angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 大鼠血管生成素2(ANG-2)試劑盒
HumanAi-mitochondriaaoaibodies,AMAELISAKit 人抗線粒體抗體(AMA)試劑盒 進口分裝
Humancytotoxin,CTX試劑盒人細胞毒素(CTX)試劑盒
組織IKKα激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanplasminogenactivator，PLGAELISAKit人纖溶酶原激活劑(PLGA)試劑盒
小鼠胃泌酸調(diào)節(jié)素(OXM)試劑盒 96T/48T
Human phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) ELISA Kit 人0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)試劑盒
Humanalkalinephosphatase,ALPELISAKit 人堿性0酸酶(ALP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenIerleukin1,IL-1試劑盒雞白介素1(IL-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞ERK蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒規(guī)格：96T/48T
雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit ELISA.
雞免疫球蛋白E(IgE)ELISAKit ELISA.
雞免疫球蛋白A(IgA)ELISAKit ELISA.
ACHE重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白 Protein
AR (Androgen Receptor 0.5mgAR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)
ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標(biāo)簽)
CEACAM3 Others Human 人 CEACAM3 / CD66D 人細胞裂解液 人前列腺成纖維細胞裂解物HPrFL ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細胞裂解液 FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 小鼠原代牙齦干細胞 小鼠原代乳腺成纖維細胞
大鼠口腔上皮原代細胞PS-1(NT 0.5mgPS-1(NT)，Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原)
AKR1C4 Protein Human 重組人 AKR1C4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標(biāo)簽) Protein
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
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