大鼠卵巢成纖維原代細胞

大鼠卵巢成纖維原代細胞

大鼠卵巢成纖維細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發(fā)育（右側已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構，而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內(nèi)部結構可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結締組織構成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結締組織構成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細胞大多分布于卵巢表面，其主要特點和功能：①成纖維細胞在體外易于培養(yǎng)；②卵巢損傷后，成纖維細胞能修復和重塑卵巢；③能在卵巢炎癥時有效控制炎癥擴散。

產(chǎn)品名稱：大鼠卵巢成纖維細胞

組織來源：卵巢組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠卵巢成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠卵巢成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒

People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)試劑盒

Humanai-macrophageaibodyELISAKit 人抗巨噬細胞抗體(ai-macrophageAb)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanepidemicparotitis,EP試劑盒人流行性腮腺(EP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織PKG激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽(PP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytokeratin 18 (CK-18) ELISA Kit 人細胞角蛋白18(CK-18)試劑盒

Humanmicroansferrinuria,MTFELISAKit 人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclinDependeKinase5,CDK5試劑盒人周期素依賴性激酶5(CDK5)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織FGFR4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPresenilin2,PS-2ELISAKit人早老素2(PS-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)試劑盒   96T/48T

人狀瘤病毒抗體(HPV)試劑盒   96T/48T

人瘤病毒58（HPV-58）試劑盒   96T/48T

人瘤病毒18（HPV-18）試劑盒   96T/48T

CXADR重組小鼠 CXADR / CAR 蛋白 Protein

骨成型蛋白2(BMP2)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)

PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白 (aa 30-390, His & GST 標簽) Protein

CEACAM3 Protein Human 重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白

TGFB2 Protein Canine 重組狗 TGFB2 / TGF-beta 2 蛋白

CFSC-2G細胞，大鼠肝星形細胞 7721(7721肝癌細胞) tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6  RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細胞裂解液   散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21 人成纖維細胞，Hs 578Bst細胞 小鼠原代胸主動脈平滑肌細胞 小鼠原代鞏膜成纖維細胞

大鼠卵巢成纖維原代細胞轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)天然蛋白 Native Transferrin Receptor (TFR)

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)

CD6重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白 Protein

PRLR Protein Rat 重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白

CCL1重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 Protein