大鼠前列腺基質原代細胞

大鼠前列腺基質原代細胞

大鼠前列腺基質細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對的實質性器宮，由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構成精液主要成分；作為內分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。常見疾病為良性前列腺增生，在病理學上良性前列腺增生癥又稱前列腺結節(jié)狀增生，是前列腺中最常見的產(chǎn)生癥狀的瘤樣病變，結節(jié)開始發(fā)生可能是基質細胞自發(fā)逆轉至胚胎階段，其生長潛力可能是基質-上皮之間的相互協(xié)同作用所致，最終形成前列腺增生?；|細胞是器官中結締組織細胞，起到為器官中實質細胞提供支持和營養(yǎng)的作用，成纖維細胞、炎癥細胞、免疫細胞以及周皮細胞都是常見的基質細胞類型?；|細胞和腫瘤細胞的相互作用在腫瘤細胞的生長過程中具有重要作用。體外培養(yǎng)前列腺基質細胞對治療前列腺增生有重要的研究意義。

產(chǎn)品名稱：大鼠前列腺基質細胞

組織來源：前列腺

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠前列腺基質細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實驗室分離的大鼠前列腺基質采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的大鼠前列腺基質經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

人抑制素(INH)ELISA 試劑盒

Human anscription factor aibody -1 (ATF-1) ELISA Kit 人轉錄因子抗體-1(ATF-1)試劑盒

Human8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit 人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanIerleukin12,IL-12/P70試劑盒人白介素12(IL-12/P70)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定量PCR擴增試劑盒20次

HumanInvolucrin,iNVELISAKit人套膜蛋白(iNV)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytochrome P450c21B/21- hydroxylase (CYP21B) ELISA Kit 人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)試劑盒

Humanai-Bactericidalpermeabilityincreasingproteinaibody,BPI-AbELISAKit 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclosporineA,CsA試劑盒人A(CsA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性試劑盒20次

Humanpokeweedmitogen，PWMELISAKit人美洲商陸素(PWM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人載脂蛋白E試劑盒   人載脂蛋白E試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人載脂蛋白E試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人載脂蛋白E試劑盒、人載脂蛋白E 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人載脂蛋白C3試劑盒   人載脂蛋白C3試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人載脂蛋白C3試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人載脂蛋白C3試劑盒、人載脂蛋白C3 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人載脂蛋白B100試劑盒   人載脂蛋白B100試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人載脂蛋白B100試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人載脂蛋白B100試劑盒、人載脂蛋白B100 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人載脂蛋白A5試劑盒   人載脂蛋白A5試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人載脂蛋白A5試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人載脂蛋白A5試劑盒、人載脂蛋白A5 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

CD63重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)

FCER2重組人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein

H1F0 Protein Human 重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白

PCSK9 Protein Mouse 重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白

CM-M085小鼠表皮角化細胞MDK Others Human 人 Midkine / MDK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   草魚肝臟細胞;L8824 人視網(wǎng)膜母細胞瘤，WERI-Rb-1細胞 KB(口腔表皮樣癌細胞)  COS-7 非洲綠猴SV40 小鼠原代腎周細胞 小鼠原代股動脈內皮細胞

大鼠前列腺基質原代細胞Beta-Amyloid(1-16 0.5mgBeta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽1-16(多肽蛋白)

ITGA5 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 蛋白

CTLA4重組小鼠 CTLA4 / CD152 蛋白 Protein

ADAM17 Protein Rat 重組大鼠 ADAM17 蛋白

NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽) Protein