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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠視乳頭星形膠質(zhì)采用-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠視乳頭星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠視乳頭星形膠質(zhì)原代細胞 | 組織來源 | 眼球 |
英文名稱 | Rat Optic Papilla Astrocyte Cells | 貨號 | YS-01X7457 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細胞分離自視乳頭；視乳頭位于黃斑區(qū)鼻側(cè)附近，境界清楚，呈白色、圓盤狀，因此也稱為視盤。視網(wǎng)膜上視覺纖維在此匯集，并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭中央有一小凹陷區(qū)，稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視纖維聚合組成視的起始端，它沒有視細胞，因而沒有視覺，在視野中是生理盲點。視乳頭是開角型青光眼早受損的部位，星形膠質(zhì)細胞是視乳頭處主要的膠質(zhì)細胞類型，可為視網(wǎng)膜節(jié)細胞無髓鞘的軸突提供結(jié)構(gòu)和生物支持。青光眼視病變是位不可逆性致肓眼病。青光眼視病變以視網(wǎng)膜節(jié)細胞軸突喪失并伴有視乳頭處細胞外基質(zhì)重坦為主要特征。導致視網(wǎng)膜節(jié)細胞喪失的病理生理機制尚未闡明，膠質(zhì)細胞對調(diào)控元微環(huán)境起多重作用，越來越多的證據(jù)表明膠質(zhì)細胞町能對系統(tǒng)發(fā)育、損傷、修復及再生起極為關(guān)鍵的作用。視乳頭星形膠質(zhì)細胞胞體多扁平，體積較大，形狀多呈不規(guī)則的多邊形，突起較粗，胞核為橢圓形，核仁清晰可見，核周有較密集物質(zhì)，胞質(zhì)稀疏，骨架結(jié)構(gòu)良好，明顯不同于長梭形的成纖維細胞形態(tài)。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
大鼠周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)試劑盒 ，英文名： CDKN2A ELISA Kit
Mouse ai platelet aibody IgG/M/A (PA-IgG/M/A) ELISA Kit 小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒
MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit 小鼠腦源性營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽
微型RNA(miRNA)北方雜交試劑盒5次
ELISAKitMIF大鼠巨噬細胞移動抑制因子
小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat glycated hemoglobin A1c (GHbA1c) ELISA Kit 大鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)試劑盒
HumanFreeThyroxine,FT4ELISAKit 人游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancoagulationfactorⅡ,FⅡ試劑盒人Ⅱ(FⅡ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白脫乙?；?span>5(HDAC5)活性比色法定量試劑盒20次
Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit人結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠抗抗體(AOAb)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒 96T/48T
小鼠抗鹽抵抗的酸性0酸酶(AP)試劑盒 96T/48T
小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒 96T/48T
BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 蛋白 (Fc 標簽) Protein
Tachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor 0.5mgTachyplesin I(Tachyplesin-1 precursor ) 抗菌肽
THPO重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 Protein
CSF1 Protein Human 重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白
TNFRSF10A Protein Human 重組人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 (His & Fc 標簽)
CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人細胞裂解液 Promocell C-27439 Adipocyte Nuition Medium KIT, 脂肪細胞營養(yǎng)套裝 500ml CD97 Others Human 人 CD97 人細胞裂解液 小鼠原代臍靜脈內(nèi)皮細胞 兔原代胰腺星狀細胞
大鼠視乳頭星形膠質(zhì)原代細胞RSV-G重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 蛋白 (93% Homology) Protein
TLR3 (Toll-like receptor 3 0.5mgTLR3 (Toll-like receptor 3) Toll樣受體3抗原
GFPT1重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白 Protein
CSF1 Protein Human 重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白
SDF2 Protein Human 重組人 SDF2 蛋白
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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