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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠心臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠心臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠心臟微血管內(nèi)皮原代細胞 | 組織來源 | 心臟組織 |
英文名稱 | Rat Cardiac Microvascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7428 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內(nèi)皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
大鼠誘導型合酶(NOS2)試劑盒 ，英文名： NOS2 ELISA Kit
Mouse follistatin (FS) ELISA Kit 小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒
Mousemaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHumanEamoebahistolyticaAigenELISAKit人痢疾內(nèi)阿米巴抗原
細胞3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動力比色法定量試劑盒20次
ELISAKitACV-RAb大鼠活化素A受體抗體
小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)試劑盒 96T/48T
Rat ovarian cancer marker-CA125 CA125 ELISA Kit 大鼠卵巢癌標志物CA125 試劑盒
humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-Nogo-Aaibody,NOGO-AAb試劑盒人NOGO-A抗體(Nogo-AAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物酸性0酸酶總活性比色法定量試劑盒20次
HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit人超敏生長激素(US-GH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠β-防御素(β-DF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠絲蛋白(NF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)ELISAKit ELISA. 96T/48T
CNTNAP2重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白 Protein
ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide 0.5mgATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶通道蛋白抗原
ENPP2重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 Protein
FGFR4 Protein Human 重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白
IL25 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標簽)
EFNA5 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽) 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A 非洲綠猴腎細胞;VERO-76 Hurt-78細胞，人T細胞淋巴瘤 小鼠胚胎成纖維細胞,3T3-swiss albino細胞 小鼠原代結膜上皮細胞 人原代食管成纖維細胞
大鼠心臟微血管內(nèi)皮原代細胞CRP (C-reactive protin 0.5mgCRP (C-reactive protin) C-反應蛋白(抗原)
DKKL1 Protein Human 重組人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 蛋白 (Fc 標簽)
SERPINE1重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
SERPINA7 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA7 / TBG 蛋白
IGFBP7重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 Protein
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