化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠牙胚采用膠原酶消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠牙胚經(jīng)檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠牙胚原代細胞 | 組織來源 | 牙胚組織 |
英文名稱 | Rat Tooth Germ Cells | 貨號 | YS-01X7712 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠牙胚細胞分離自牙胚組織；牙胚是牙齒開始發(fā)育階段的形態(tài)，是由牙板向深層的結締組織內伸延，在其末端細胞增生，進一步發(fā)育成牙胚。牙胚有三部分組成：①成釉器（enamel organ），起源于口腔外胚層，形成釉質；②牙乳頭（dental papilla），起源于外胚層間充質，形成牙髓和牙本質；③牙囊（dental sac），起源于外胚層間充質，形成牙骨質、牙周膜和固有牙槽骨。牙胚的發(fā)生是口腔上皮和外胚間充質相互作用的結果。在胚胎的第5周，覆蓋在原口腔的上皮由兩層細胞組成，外層是扁平上皮細胞，內層為矮柱狀的基底細胞。在未來的牙槽突區(qū)，深層的外胚層間充組織誘導上皮增生，開始僅在上下頜弓的特定點上，上皮局部增生，很快增厚的上皮相互連接，依照頜骨的外形形成一馬蹄形上皮帶，稱為原發(fā)性上皮帶。在胚胎的第7周，這一上皮帶繼續(xù)向深層生長，并分裂為兩個：向頰（唇）方向生長的上皮板稱前庭板，位于舌（腭）側的上皮板稱為牙板（dental lamina）。在胚胎的第8~10周，前庭板繼續(xù)向深層生長，與發(fā)育的牙槽嵴分開，前庭板表面上皮變性，形成口腔前庭溝。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
大鼠胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)試劑盒 ，英文名： REG4 ELISA Kit
Mouse endocrine gland vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) ELISA Kit 小鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)試劑盒
MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumancytovillin/ezrin,CVLELISAKit人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白
細胞ARG/ABL2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitC4a大鼠過敏毒素/補體片斷4a
小鼠(CH)Elisa 試劑盒 96T/48T
Human placea growth factor (PLGF) ELISA Kit 人胎盤生長因子(PLGF)試劑盒
Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 人纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor,BAFF-R試劑盒人B細胞活化因子受體(BAFF-R)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物源性飼料油菜(canola)試劑盒20次
Humahrombieceptor,ELISAKit人受體()試劑盒規(guī)格：96T/48T
唾液酸（SA）測試盒（帶SA標準） Saliva acid (SA) test case (with SA standard)
肝素溶液 Heparin solion
肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube
肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube
MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 標簽) Protein
天冬轉氨酶(AST)重組蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)
PEBP1重組人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein
CPM Protein Human 重組人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
EM2 Others Human 人 EM2 人細胞裂解液 成纖維細胞-2(用于心肌成纖維細胞)FM-2 ACVR1B Others Human 人 ALK4 / ACVR1B 人細胞裂解液 人胚肺成纖維細胞;CCC-HPF-1 KYSE450 小鼠原代甲狀腺成纖維細胞 小鼠原代脊髓成纖維細胞
大鼠牙胚原代細胞黏病毒耐藥蛋白1(MX1)重組蛋白 Recombinant Myxovirus Resistance 1 (MX1)
CRABP2 Protein Human 重組人 CRABP2 蛋白
PVRL2重組人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
IFNA8重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網(wǎng)