化工儀器網
詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠羊膜間質采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠羊膜間質經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠羊膜間質原代細胞 | 組織來源 | 胎盤組織 |
英文名稱 | Rat Amniotic Mesenchymal Cells | 貨號 | YS-01X7656 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠羊膜間質細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯(lián)合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的內層，與眼結膜組織結構相似，含有眼表上皮細胞，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質，其光滑，無血管、及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成，均具有多分化潛能，可轉化為元，且還有合成、釋放生物活性物質和營養(yǎng)因子的功能。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
大鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)試劑盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit
Mouse urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 小鼠型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒
Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 小鼠轉化生長因子α(TGF-α)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人
細胞BMK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMP-7大鼠骨成型蛋白7
小鼠標志物(CA724)ELISA 試劑盒
Human ai myocardial aibody (EMAb) ELISA Kit 人抗眼肌抗體(EMAb)試劑盒
HumanglathioneS-ansferases,GSTsELISAKit 人S轉移酶(GSTs)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforABM-Ab(Humanalveolibasememembranezoneaibody)ELISAKit人抗肺泡基底膜抗體
伊紅復染試劑盒50次
Mouseniicoxide,NOELISAKit小鼠(NO)試劑盒
豬低分子肝素(LMWH)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬蛋白激酶A(PKA)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
CD36重組小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein
Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽 100mgBursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽
CCL15重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標簽) Protein
CTNNB1 Protein Human 重組人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 標簽)
NTRK1 Protein Rat 重組大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)
ERBB2 Others Mouse 小鼠 HER2 / ErbB2 人細胞裂解液 HBL-100(人整合SV40基因的上皮細胞) CL-0380MDA-MB-157(人癌細胞) 中國倉鼠肺細胞;V79 FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 小鼠原代滑膜成纖維細胞 兔原代臍帶間充質干細胞
大鼠羊膜間質原代細胞TGF- Beta R2 peptide 轉移生長因子β受體2(多肽抗原 0.5mgTGF- Beta R2 peptide 轉移生長因子β受體2(多肽抗原)
GHRH Protein Human 重組人 GHRH 蛋白 (Fc 標簽)
GP120重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group P, strain RBF168) Protein
CEACAM6 Protein Human 重組人 CEACAM6 / CD66c 蛋白
ANGPTL5重組人 ANGPTL5 蛋白 (GST 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網