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詳細介紹
人瘢痕疙瘩成纖維原代細胞
人瘢痕疙瘩成纖維細胞分離自皮膚瘢痕疙瘩組織；瘢痕疙瘩，俗稱疤痕疙瘩，是皮膚傷口愈合或不明原因所致皮膚損傷愈合后所形成的過度生長的異常瘢痕組織，目前學術界認為各種原因導致的瘢痕如具有以下特點，可診斷為瘢痕疙瘩：①病變超過原始皮膚損傷范圍；②呈持續(xù)性生長；③高起皮膚表面、質硬韌、顏色發(fā)紅的結節(jié)狀、條索狀或片狀腫塊。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的瘢痕疙瘩成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。瘢痕疙瘩成纖維細胞同正常皮膚成纖維細胞在形態(tài)上沒有表現(xiàn)出明顯的差異。瘢痕疙瘩成纖維細胞生長同正常皮膚成纖維細胞的生長沒有明顯的差別。癜痕成纖維細胞對血清的依賴性低于正常皮膚成纖維細胞。
英文名稱 | Human Keloid Fibroblast cells | 組織來源 | 皮膚組織 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7680 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人瘢痕疙瘩成纖維細胞
組織來源：皮膚組織
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人瘢痕疙瘩成纖維采用先蛋白酶消化、后-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人瘢痕疙瘩成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7 | OVA sIgE ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特異性IgEMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf194： 1號染色體開放閱讀框194抗體 0.2ml | Guanylyl Cyclase alpha 1： 鳥苷酸環(huán)化酶α1/GCS-α-1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CGB 嗜鉻粒素B抗體 規(guī)格 0.1ml | pan methyl Lysine： 泛甲基賴酸抗體 0.2ml |
Anti-NKG2D/CD314 /FITC 熒光素標記NK細胞受體/自然殺傷細胞活化性受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GZMB/CCPI(Granzyme B) 顆粒酶B抗原 0.5mg |
Rabbit Anti-chi IgM/FITC 熒光素標記兔抗雞IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | MLCK： 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 0.1ml |
PTPN11 Others Mouse 小鼠 SHP2 / PTPN11 人細胞裂解液 (陽性對照) | EPOR Others Human 人 EPO Receptor / EPOR 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人胚肺成纖維細胞;MRC-5 | SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Promocell C-26040 Placeal Epithelial CellGrowth Medium, 胎盤上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml | PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9803 人顱蓋造骨細胞培養(yǎng)基 100mL | SK-OV-3細胞，人卵巢癌細胞 大鼠皮層元細胞,RN-c細胞 胃粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
成纖維細胞培養(yǎng)基-2(用于心肌成纖維細胞)FM-2 | 人瘢痕疙瘩成纖維原代細胞pan methyl Lysine： 泛甲基賴酸抗體 0.2ml |
A549, 人肺癌細胞系 T細胞白血病細胞,HPB-ALL細胞 RKO(結腸腺癌細胞) | 人橫紋肌肉瘤細胞;A-204 |
人張氏肝細胞;Chang liver | IL12B Others Rat 大鼠 IL12B / IL-12B 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SERPINF2 Others Human 人 SerpinF2 / SERPINF2 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-phospho-IKK gamma (Ser85) /FITC 熒光素標記0酸化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-RET/C ret 指狀蛋白RET抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;C918 大鼠前脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-NFKB p65(Ser276) 0酸化細胞核因子NF-κB p65抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLK11 11抗體 規(guī)格 0.1ml |
MHC ELISA Kit 魚類主要組織相容性復合體 96T | PTPN11 Others Mouse 小鼠 SHP2 / PTPN11 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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