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本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人睪丸支持采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人睪丸支持經(jīng)Fas-L免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人睪丸支持原代細胞 | 組織來源 | 睪丸組織 |
英文名稱 | Human Sertoli Cells | 貨號 | YS-01X7233 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人睪丸支持細胞分離自睪丸；睪丸支持細胞又稱Sertoli細胞，在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形，細胞基部附著在基膜上，頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細胞的支架，為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白，為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等，還具有構(gòu)成血-睪屏障，形成睪丸內(nèi)微環(huán)境，調(diào)節(jié)發(fā)生等功能。睪丸支持細胞是睪丸的主要組成細胞，能分泌多種生長因子和免疫抑制因子，不僅可為提供營養(yǎng)支持和免疫保護，也能對其他細胞，如胰島和細胞提供營養(yǎng)支持，而且當其與胰島或細胞共移植時，也能夠為這些細胞提供免疫保護，提高植活率。因此，睪丸支持細胞在細胞移植中具有廣泛的應用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎(chǔ)研究有重要價值，而且在發(fā)生等領(lǐng)域有重要意義。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
原代元細胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml | Col IV ELISA KIT 大鼠Ⅳ型膠原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf182： 1號染色體開放閱讀框182抗體 0.2ml | phospho-GCN2 (Thr667)： 0酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CETP 酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | PAK4： 小鼠抗p21激活激酶4抗體 0.2ml |
Anti-SIGLEC10/SLG2/FITC 熒光素標記唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗原 0.5mg |
IgG/FITC 熒光素標記兔抗馬IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | MAP3K8： 原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.2ml |
SEMA4D Others Cynomolgus 食蟹猴 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) | BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人膀胱基質(zhì)成纖維細胞總RNAHBdSF NA | ATF2 Others Human 人 ATF2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CLEC14A Others Mouse 小鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HUAEC-c 人臍動脈內(nèi)皮細胞(HUAEC) 500,000cells 腸靜脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Hep 3B2.1-7[Hep 3B;Hep-3B;Hep3B]細胞，人肝癌細胞 人胚腎細胞(亞系克隆),FIP293細胞 胎兒表皮角化細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11 | 人睪丸支持原代細胞PAK4： 小鼠抗p21激活激酶4抗體 0.2ml |
COS-1細胞，SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞 人大腸癌細胞,PA319細胞 CM-R005大鼠氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | 人喉癌上皮細胞;Hep-2 |
CSSTSP1 中華鱉脾來源細胞 | BBOX1 Others Human 人 BBOX1 / Gamma-BBH 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
hMNC-PB-c pooledula-pure 人單核細胞，來自外周血，混合來源，超 人心臟微血管內(nèi)皮細胞HCMEC | Anti-Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) /FITC 熒光素標記0酸化核因子κB激酶alpha/beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-RelB 核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | VSMC細胞，大鼠胸主動脈平滑肌細胞 786-0(腎透明細胞腺癌) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化) |
Rhesus antibody Rh Phospho-HER4 (Tyr1162) 0酸化HER4抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL36/C16orf44 Kelch樣蛋白36抗體 規(guī)格 0.2ml |
P 孕酮 96T | SEMA4D Others Cynomolgus 食蟹猴 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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