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詳細(xì)介紹
人骨髓單個(gè)核原代細(xì)胞
人骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個(gè)核細(xì)胞是骨髓中具有單個(gè)核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。注意這里是（mononuclear cell）單個(gè)核細(xì)胞，而不是（Monocyte）單核細(xì)胞。單個(gè)核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同，利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心，使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，可將各種血細(xì)胞與單個(gè)核細(xì)胞分離。
英文名稱 | Human Bone Marrow Mononuclear Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7689 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人骨髓單個(gè)核細(xì)胞
組織來源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓單個(gè)核采用取骨髓、通過密度梯度離心法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓單個(gè)核經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
原代膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml | HK ELISA Kit 大鼠己糖激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf180： 1號(hào)染色體開放閱讀框180抗體 0.2ml | Phospho-GCN2 (Thr899)： 0酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CESK1 分子伴侶CESK1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | PCDHAC2： 原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體 0.2ml |
Anti-SIGLEC11/FITC 熒光素標(biāo)記唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗原 0.5mg |
IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | MTF-1： 金屬應(yīng)答元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1抗體 0.2ml |
EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | A7r5(大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC |
人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞cDNAHBdSF cDNA | CTSB Others Mouse 小鼠 Cathepsin-B / CTSB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
KP-N-NS(人腎上腺母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 破傷風(fēng)桿菌/梭菌Closidium tetani | CD2 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1 中國倉鼠卵巢細(xì)胞，CHO細(xì)胞 Lncap(前列腺癌細(xì)胞) |
表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人骨髓單個(gè)核原代細(xì)胞PCDHAC2： 原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體 0.2ml |
小鼠干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) 人肺癌細(xì)胞，NCI-H596[H596]細(xì)胞 NG108-15 [ 108CC15 ](小鼠細(xì)胞瘤與大鼠膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞) | 人滑膜細(xì)胞cDNAHS cDNA |
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
GRN Others Human 人 Granulin / GRN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化核因子κB激酶alpha/beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-RelB (Ser552) 0酸化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | 黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR 高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞，95-D細(xì)胞 STO細(xì)胞，鼠胚成纖維細(xì)胞系 |
Rhesus antibody Rh Phospho-Numb (Ser276) 0酸化膜相關(guān)蛋白Numb抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL32 Kelch樣蛋白32抗體 規(guī)格 0.2ml |
PLH 催乳素 96T | EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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