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詳細介紹
人骨髓來源巨噬原代細胞
人骨髓來源巨噬細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。
英文名稱 | Human Bone Marrow-Derived Macrophage Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7562 |
細胞形態(tài) | 巨噬細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人骨髓來源巨噬細胞
組織來源：骨髓
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 巨噬細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 （12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人骨髓來源巨噬采用分離骨髓單個核細胞經細胞因子誘導分化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人骨髓來源巨噬經CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
Reh人急性非B非T淋巴細胞白血病 Reh human acute non B non T lymphocytic leukemia IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | Kim-1 ELISA Kit 大鼠腎損傷分子1 96T |
RAD54B： DNA修復和重組蛋白RAD54B抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh RAB9 ras癌基因家族Rab9蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-DcR3/FITC 熒光素標記抗誘捕受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Phospho-CHEK1 (Ser296)： 0酸化細胞周期檢測點激酶1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh BSCL2/SPG17 先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17) 規(guī)格 0.2ml | Anti-CRP/FITC 熒光素標記C-反應蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
細胞外基質蛋白1抗體 Anti-ECM1 0.2ml | ASAH1： 酸性酰胺酶1抗體 0.2ml |
FGF2 Protein Human 重組人 bFGF / FGF2 蛋白 | MDA-MB-435S 人導管癌細胞 |
A549人非小細胞肺癌細胞 A549 cells in human non small cell lung cancer F-12K+10% FBS | MDK Protein Human 重組人 Midkine / MDK 蛋白 |
CM-H032人食管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | rCF, 大鼠心臟成纖維細胞 Rattus |
大鼠子宮頸上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
正常小鼠Sertoli細胞;TM4 小鼠子宮平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | 人骨髓來源巨噬原代細胞Phospho-CHEK1 (Ser296)： 0酸化細胞周期檢測點激酶1抗體 0.1ml |
大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5 | HMy2.CIR人B淋巴母細胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS |
NHDF-c adult 正常人皮膚成纖維細胞(NHDF)來自成年捐獻者 500,000cells 成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | NCI-H157(人非小細胞肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38] | Rabbit Anti-IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標記的兔抗豬IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GYG1 糖原蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml | 人氣管平滑肌細胞HTSMC |
Alpha-ENaC： 通道蛋白α ENaC 0.2ml | Anti-phospho-LKB1(Ser428) 0酸化絲/蘇蛋白激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
AFP(Mouse Alpha-fetoprotein) ELISA Kit 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | FGF2 Protein Human 重組人 bFGF / FGF2 蛋白 |
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