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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人臍帶血單核采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人臍帶血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人臍帶血單核原代細胞 | 組織來源 | 臍帶血 |
英文名稱 | Human Umbilical Cord Blood Monocyte Cells | 貨號 | YS-01X7117 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人臍帶血單核細胞分離自臍帶血；臍帶血是胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn)，臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細胞，可用于造血干細胞移植，因此，臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞，結出各種不同的果實——血液細胞、細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復等方面發(fā)揮積極作用。血液中的單核細胞來源于骨髓干細胞分化出的髓樣干細胞，是機體防御系統(tǒng)的一個重要組成部分。單核細胞能吞噬異物產(chǎn)生抗體，在機體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面起著重要的作用。機體發(fā)生炎癥或其他疾病都可引起單核細胞總數(shù)百分比發(fā)生變化，因此，檢查單核細胞計數(shù)成為輔助診斷的一種重要方法。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細胞形態(tài) 圓形、巨噬細胞樣
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
胰腺星狀細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | TSGF ELISA Kit 大鼠特異生長因子/相關因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf185： 1號染色體開放閱讀框185抗體 0.2ml | GnRHR： 釋放激素受體抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CENPP 著絲粒蛋白P抗體 規(guī)格 0.2ml | PCDHA9： 原鈣粘附蛋白α9抗體 0.2ml |
Anti-Nogo R/NGR /FITC 熒光素標記軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GATA-4(GATA binding factor 4) GATA結合蛋白4抗原 0.5mg |
Goat Anti-Bovine IgM/Gold 金標記羊抗IgM(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MLH1： 錯配修復蛋白1抗體 0.1ml |
APOA1 Others Mouse 小鼠 ApoA1 人細胞裂解液 (陽性對照) | SH-SY5Y(人母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16 | CD68 Others Human 人 CD68 / Macrosialin / Gp110 (aa 1-319) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
NCI-H1650(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | RNASET2 Others Human 人 RNASET2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人細胞裂解液 (陽性對照) | TE 115.T細胞，人軟組織纖維瘤細胞 SV40永生化的人胚腎上皮細胞,293T細胞 腎小球內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3 | 人臍帶血單核原代細胞PCDHA9： 原鈣粘附蛋白α9抗體 0.2ml |
COS-7非洲綠猴SV40轉化的腎細胞 Renal cell COS-7 in African green monkey SV40 ansformation DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | 人脊髓星形膠質細胞HA-sp |
彈(含100mL酶解緩沖液) 10mL | HCST Others Human 人 HCST / DAP10 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Anti-IL-6/FITC 熒光素標記白介素6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-Rictor (Thr1135) 0酸化雷帕靶蛋白復合體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質母細胞瘤)5×106cells/瓶×2 |
Rhesus antibody Rh Phospho-MSK1 (Ser376) 0酸化有絲分裂原和應激活化型蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL13 kelch樣蛋白13抗體 規(guī)格 0.2ml |
HBeAg 乙型肝炎e抗原 96T | APOA1 Others Mouse 小鼠 ApoA1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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