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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人臍帶血間充質(zhì)干采用密度梯度離心法、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人臍帶血間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人臍帶血間充質(zhì)干原代細胞 | 組織來源 | 臍帶血 |
英文名稱 | Human Umbilical Cord Blood Mesenchymal Stem Cells | 貨號 | YS-01X7503 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人臍帶血間充質(zhì)干細胞分離自臍帶血；臍帶血是胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn)，臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細胞，可用于造血干細胞移植；因此，臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞，結出各種不同的果實——血液細胞、細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下，可分化為多種造血細胞以外的組織細胞，并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復等作用；目前，多用于風濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子，促進造血干細胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復作用，可減輕移植物抗宿主?。?span>GVHD）及其他移植相關并發(fā)癥。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
Lec1倉鼠卵巢細胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | Rhesus antibody Rh GHDC GHDC蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Human Cyclin-D2 ELISA Kit 人細胞周期素D2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/Cy5 Cy5標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IFN gamma： 干擾素-γ/IFN-γ抗體 0.1ml | GP-II(Mouse Glycogen phosphorylase II)ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II 96T |
Rhesus antibody Rh RIAM/APBB1 interacting protein 1 β淀粉樣蛋白前體結合蛋白B-1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-LAIR-2/CD306/FITC 熒光素標記白細胞相關免疫球蛋白樣受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser422) 0酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | MHC- III /H-2 III (Mouse major histocompatibility complex- III ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類 96T |
IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標簽) | CL-0461UACC-812(人導管瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細胞 MSU-2細胞 QSG-7701(肝細胞) | 人腎癌細胞;A498 |
CM-M088小鼠破骨細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠腦瘤細胞;BC3H1 |
大鼠子宮成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | 比色法GAPDH分析試劑盒GAPDH |
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株 小細胞肺癌細胞,LIEP-P細胞 DT40(雞淋巴瘤細胞) | 人臍帶血間充質(zhì)干原代細胞GP-II(Mouse Glycogen phosphorylase II)ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II 96T |
大鼠皮膚肥大細胞培養(yǎng)基 100mL | CRT(人膠質(zhì)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 腸靜脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H037人結腸平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL |
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽) | Rhesus antibody Rh APOC4/Apolipoprotein CIV 載脂蛋白C4抗體 規(guī)格 0.2ml |
BPGM： 紅細胞2,3 - 二0酸甘油酸合成酶抗體 0.2ml | PANC-1 人胰腺癌細胞 |
Anti-Survivin/FITC 綠色熒光素標記Survivin蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Protein Z： 蛋白Z抗體 0.2ml |
Anti-CD161/NK1.1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD161抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標簽) |
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