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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍帶血間充質(zhì)干采用密度梯度離心法、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍帶血間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人臍帶血間充質(zhì)干原代細(xì)胞 | 組織來源 | 臍帶血 |
英文名稱 | Human Umbilical Cord Blood Mesenchymal Stem Cells | 貨號(hào) | YS-01X7503 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞分離自臍帶血；臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn)，臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細(xì)胞，可用于造血干細(xì)胞移植；因此，臍帶血已成為造血干細(xì)胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細(xì)胞，干細(xì)胞是生命的種子，它會(huì)分化成機(jī)體的各種細(xì)胞，結(jié)出各種不同的果實(shí)——血液細(xì)胞、細(xì)胞、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群體；這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量，又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞，并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用；目前，多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長因子，促進(jìn)造血干細(xì)胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用，可減輕移植物抗宿主?。?span>GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
Lec1倉鼠卵巢細(xì)胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | Rhesus antibody Rh GHDC GHDC蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Human Cyclin-D2 ELISA Kit 人細(xì)胞周期素D2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IFN gamma： 干擾素-γ/IFN-γ抗體 0.1ml | GP-II(Mouse Glycogen phosphorylase II)ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II 96T |
Rhesus antibody Rh RIAM/APBB1 interacting protein 1 β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-LAIR-2/CD306/FITC 熒光素標(biāo)記白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser422) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | MHC- III /H-2 III (Mouse major histocompatibility complex- III ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類 96T |
IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | CL-0461UACC-812(人導(dǎo)管瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 MSU-2細(xì)胞 QSG-7701(肝細(xì)胞) | 人腎癌細(xì)胞;A498 |
CM-M088小鼠破骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1 |
大鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 比色法GAPDH分析試劑盒GAPDH |
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,LIEP-P細(xì)胞 DT40(雞淋巴瘤細(xì)胞) | 人臍帶血間充質(zhì)干原代細(xì)胞GP-II(Mouse Glycogen phosphorylase II)ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II 96T |
大鼠皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CRT(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CM-H037人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標(biāo)簽) | Rhesus antibody Rh APOC4/Apolipoprotein CIV 載脂蛋白C4抗體 規(guī)格 0.2ml |
BPGM： 紅細(xì)胞2,3 - 二0酸甘油酸合成酶抗體 0.2ml | PANC-1 人胰腺癌細(xì)胞 |
Anti-Survivin/FITC 綠色熒光素標(biāo)記Survivin蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Protein Z： 蛋白Z抗體 0.2ml |
Anti-CD161/NK1.1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD161抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
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