詳細(xì)介紹
人臍帶血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞
人臍帶血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞分離自臍帶血;臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn),臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細(xì)胞,可用于造血干細(xì)胞移植;因此,臍帶血已成為造血干細(xì)胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細(xì)胞,干細(xì)胞是生命的種子,它會分化成機(jī)體的各種細(xì)胞,結(jié)出各種不同的果實(shí)——血液細(xì)胞、細(xì)胞、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群體;這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量,又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞,從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,亦稱為成血管細(xì)胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn)。
英文名稱 | Human Umbilical Cord Blood-Derived Endothelial Progenitor Cells | 組織來源 | 臍帶血 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7548 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:人臍帶血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞
組織來源:臍帶血
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代;不建議多次傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍帶血來源內(nèi)皮祖采用密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍帶血來源內(nèi)皮祖經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | NDRG4: 抑癌基因NDRG4抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MDFIC 肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-TREML2/TLT2/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Erdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽 0.5mg | Anti-OAT4L/URAT1 尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Anti-F1 operon positive regulatory protein(CT)/FITC 熒光素標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC44A1/CD92 溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho-PEA15 (Ser116) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Anti-arfaptin 1/FITC 熒光素標(biāo)記ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
FCGR3A Others Rat 大鼠 CD16a / FCGR3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人毛細(xì)胞總RNAHHDPC NA | ITGA8 & ITGB1 Others Human 人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | ALCAM Others Rat 大鼠 ALCAM / CD166 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EB (NBL-4) (牛胚氣管細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂體細(xì)胞RPC | MAPK14 Others Human 人 p38 alpha / MAPK14 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3 | 人臍帶血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞Anti-OAT4L/URAT1 尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1) | ACP5 Others Mouse 小鼠 ACP5 / AP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CMT93細(xì)胞,小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 NCL-H460(非小細(xì)胞肺癌) 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S4 | GADD34: 生長抑制DNA損傷基因34抗體 0.1ml |
Human Complement fragment 5a,C5a ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷5aMulti-class antibodies規(guī)格: 48T | BLNK Others Human 人 BLNK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
0酸酯酶-2Ac抗體 Anti-PP2Ac 0.1ml | Gp49a(Human glycoprotein 49A) ELISA Kit 人糖蛋白49A 96T |
AMH: Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體 0.2ml | FCGR3A Others Rat 大鼠 CD16a / FCGR3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |