化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人前列腺上皮采用先蛋白酶消化、后膠原酶-聯(lián)合消化并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人前列腺上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人前列腺上皮原代細胞 | 組織來源 | 前列腺 |
英文名稱 | Human Prostate Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7081 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人前列腺上皮細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺上皮細胞與前列腺的功能關(guān)系密切，上皮細胞的損傷是前列腺炎的主要病癥，重度的前列腺炎患者的前列腺液內(nèi)可檢測到脫落的上皮細胞，這是上皮細胞損傷的標(biāo)志。炎癥發(fā)生時，與炎癥相關(guān)的一些炎癥因子可能發(fā)生變化。因此，體外培養(yǎng)前列腺上皮細胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基礎(chǔ)。前列腺主要特征如下：①前列腺結(jié)構(gòu)和功能活動均受雄性激素的調(diào)控；②基底細胞主要表達高分子量細胞角蛋白（CK-5、CK-14），基底上皮細胞可分化成管腔上皮細胞；③前列腺上皮細胞的培養(yǎng)為研究前列腺的許多重要特性以及化學(xué)和激素性致癌作用提供了機會。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
CT-26.WT細胞，小鼠大腸癌細胞 CBRH-7919(大鼠肝癌細胞) 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2 | ASB7： 含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體 0.2ml |
Anti-HMGA1 高遷移率族蛋白A1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ABCF3 三0酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白F亞基3抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser675) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFABP 小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Leptin receptor(long) 瘦素受體(長)(抗原) 0.5mg | HCV Core protein： 丙肝病毒核心抗原C區(qū)抗體 0.1ml |
IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM13C1 FAM13C1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) | 人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M IE8 |
FL62891細胞，人肝癌細胞 小鼠白血病克隆細胞系,L6565細胞 小耳豬肺細胞;SEP-L1 | MDA-MB-453(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
脂肪間質(zhì)干細胞 Adult adipose derived mesenchymal stem cells | SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人角膜成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | LEP Protein Human 重組人 Leptin 蛋白 |
SW038-C2細胞，人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞 致病性大腸埃希氏菌 人間充質(zhì)干細胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg | 人前列腺上皮原代細胞Rhesus antibody Rh IFABP 小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F | FAP Others Human 人 FAP / Seprase 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Y79細胞，人視網(wǎng)膜母細胞瘤 球毛殼霉 小鼠肺腺癌細胞系;LA795 | 小鼠牙細胞培養(yǎng)基 100mL |
Ishikawa, 人子宮內(nèi)膜癌細胞系 | Rhesus antibody Rh IgG 兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 1mg |
SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白A 96T | 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4 |
CD19(B-lymphocyte Anti-gen CD19 precursor) CD19(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | GHRH(Human growth hormone releasing hormone) ELISA Kit 人促生長激素釋放激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MAGEA11： 黑色素瘤相關(guān)抗原11抗體 0.2ml | EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網(wǎng)