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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人軟骨采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人軟骨原代細胞 | 組織來源 | 軟骨組織 |
英文名稱 | Human Chondrocyte Cells | 貨號 | YS-01X7346 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人軟骨細胞分離自軟骨組織；軟骨組織由軟骨細胞、基質(zhì)及纖維構成。軟骨組織再生能力強，這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞，以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣毎?，并形成軟骨基質(zhì)，細胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同，可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種，其中以透明軟骨的分布較廣，結構也較典型。軟骨細胞（chondrocyte）位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層，單個分布，體積較小，呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形，染色淺，細胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，軟骨細胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2~3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
BEL-7402人肝癌細胞 BEL-7402 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS | Rhesus antibody Rh GGPS1 法尼基二0酸合酶1抗體 規(guī)格 0.2ml |
MTF(Human microtransferrinuria) ELISA Kit 人微量轉鐵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IFITM1： 干擾素誘導跨膜蛋白1抗體 0.1ml | IFA(Human intrinsic factor antibody) ELISA Kit 人抗內(nèi)因子抗體 96T |
Rhesus antibody Rh Rho C RhoC抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC 熒光素標記0酸化原癌基因蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser356) 0酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | CaN ELISA Kit 大鼠鈣調(diào)0酸酶 96T |
IL34 Protein Mouse 重組小鼠 IL-34 蛋白 (His 標簽) | 615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912 |
Eca-109細胞，食管癌細胞 人食管鱗癌,KYSE 150細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A | 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4 |
上皮細胞生長添加物EpiCGS | 雪羊皮膚細胞;SSHS1 |
木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL | 細胞凋亡蛋白酶-3分析試劑盒CAS |
Hs 578T細胞，人成纖維細胞 人原胚腎轉化細胞系,293 Ad5+細胞 胰島β細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人軟骨原代細胞IFA(Human intrinsic factor antibody) ELISA Kit 人抗內(nèi)因子抗體 96T |
人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C | 人胚胎，皮膚，肌肉;M-22 人食管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
NEK7 Others Human 人 NEK7 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H045人肝動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL |
MDBK(牛腎細胞) 5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh ApoB/Apolipoprotein B 載脂蛋白B抗體 規(guī)格 0.1ml |
BMPR1A： 骨成型蛋白受體1A抗體 0.1ml | HUVEC 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞 |
Anti-VEGF-C/FITC 熒光素標記血管內(nèi)皮生長因子C型抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PARP3： 多腺苷二0酸多聚酶3抗體/多聚ADP-核糖聚合酶3 0.2ml |
Anti-CD169/Siglec-1/sialoadhesin /FITC 熒光素標記CD169抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | IL34 Protein Mouse 重組小鼠 IL-34 蛋白 (His 標簽) |
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