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詳細介紹
人神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細胞
人星形膠質(zhì)細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面，即外側(cè)面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。星形膠質(zhì)細胞，是哺乳動物腦內(nèi)分布廣泛的一類細胞，也是膠質(zhì)細胞中體積大的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術（銀染色）顯示此類膠質(zhì)細胞呈星形，從胞體發(fā)出許多長而分支的突起，伸展充填在細胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔細胞的作用。細胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足，有些腳板貼附在鄰近的毛細血管壁上，因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足，靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面，彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜。細胞剛分離時呈圓形，24h后大部分細胞貼壁，均勻分布于瓶底，部分細胞伸出細小突起，培養(yǎng)4-5d后細胞數(shù)量明顯增多，呈扁平、多角形，胞質(zhì)豐富且核漿較少，細胞核呈橢圓形，偏于胞體一側(cè)。星形膠質(zhì)細胞是中樞系統(tǒng)的重要細胞組成，不僅具有支持功能，還能夠合成及分泌多種活性物質(zhì)，在維持元內(nèi)外環(huán)境、生存、遷移、免疫調(diào)節(jié)、信號轉(zhuǎn)導、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。
英文名稱 | Human Astrocyte Cells | 組織來源 | 腦組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7390 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞
組織來源：腦組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人星形膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
雪旺細胞培養(yǎng)基SCM-prf | Anti-TSHB 促甲狀腺素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml |
PP(Human Protein Phosphatase) ELISA Kit 人蛋酸酶 96T | Anti-Phospho-MYPT1 (Thr853) /FITC 熒光素標記0酸化肌球蛋酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TIMP-1(NT) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端) 規(guī)格 0.1ml | NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人特異性烯醇化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
phospho-HRH1(Ser398)： 0酸化組胺受體H1抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CC85C 卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C抗體 規(guī)格 0.2ml |
FBXW5： FBXW5蛋白抗體 0.2ml | E ELISA Kit 大鼠雌激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
KITLG Others Human 人 SCF / C-kit ligand (aa 1-189 ) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 轉(zhuǎn)化細胞 人卵巢成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL |
人脈絡叢成纖維細胞RNAHCPF miRNA5 μg | KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 C6(腦膠質(zhì)瘤細胞) | CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Promocell C-24300 Melanocyte Growth Medium M2, 黑色素細胞生長培養(yǎng)基M2型(即用型) 500ml | FABP4 Others Mouse 小鼠 FABP4 / ALBP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
T-110B透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | 人神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細胞NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人特異性烯醇化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人細胞裂解液 (陽性對照) | OVCaR-3 人卵巢癌細胞 |
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92MI [NK92MI] | 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人腎癌細胞，A-704細胞 AGS(胃腺癌細胞) |
RK1 Others Canine 狗 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PSD-95/FITC 熒光素標記突觸后密度蛋白95抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
ompF： 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體 1ml | ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Spectrin alpha chain, non-erythrocytic 1： 血影蛋白A鏈非紅細胞型/收縮蛋白/Spectrin α抗體 0.1ml | CACNB1： 鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Bio 標記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml | KITLG Others Human 人 SCF / C-kit ligand (aa 1-189 ) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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