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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人腎癌組織源經(jīng)檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人腎癌組織源原代細胞 | 組織來源 | 腎癌組織 |
英文名稱 | Human Renal Cancer Tissue-Derived Cells | 貨號 | YS-01X7446 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人腎癌組織源細胞分離自癌組織；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤，是惡性腫瘤中常見的一類。相對應(yīng)的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名，如腎母細胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細胞分化和增殖異常、生長失去控制、浸潤性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征，其發(fā)生是一個多因子、多步驟的復(fù)雜過程，分為致癌、促癌、演進三個過程，與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關(guān)。癌細胞，是一種變異的細胞，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同，有無限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點，能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織。癌細胞除了分裂失控外（能進行多極分裂），還會局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
YAC-1細胞，淋巴瘤細胞 人結(jié)腸腺癌細胞,HT-29細胞 CM-H021人前列腺平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | AMIGO1： 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml |
Anti-HMGB1 高遷移率族蛋白B1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABCE1 核糖核酸酶L抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti- Gamma-Catenin/ Gamma-cats /FITC 熒光素標記γ-連環(huán)蛋白抗體(γ-γ鏈接素)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IDI1 異戊烯焦0酸1抗體 規(guī)格 0.2ml |
AQP9(aquaporin Protein-9) 水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原) 0.5mg | ErbB 4： HER4抗體 0.1ml |
IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM135B FAM135B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1 | 犬腎細胞;MDCK(NBL-2) |
U-2 OS細胞，骨肉瘤細胞 體細胞系,KMB-17細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3 | 小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA |
口腔角質(zhì)細胞生長添加物OKGS | H22(小鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(傣族);KM9403 |
HEC-1-B細胞，人子宮內(nèi)膜腺癌細胞 大鼠腦膜細胞,RMC細胞 胰腺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml | 人腎癌組織源原代細胞Rhesus antibody Rh IDI1 異戊烯焦0酸1抗體 規(guī)格 0.2ml |
UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌 Human | LOXL2 Others Human 人 LOXL2 / Lysyl oxidase homolog 2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
貓腎細胞;F81 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞，CGM1細胞 CCC-SMC-2細胞，兔主動脈平滑肌細胞 | 人少突膠質(zhì)細胞HO |
KeratoFectagen? 角質(zhì)細胞轉(zhuǎn)染試劑盒 | Rhesus antibody Rh sIgA/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml |
SP-R ELISA Kit 大鼠P物質(zhì)受體 96T | HEp-2(人喉表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1) 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | uE3(Human ultra Estriol) ELISA KIT 人超敏游離雌三醇Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
Phospho-mTOR (Thr2446)： 0酸化雷帕靶蛋白抗體 0.1ml | 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1 |
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