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人腎動脈內(nèi)皮原代細胞
人腎動脈內(nèi)皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈，進入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng)，再匯集成出球小動脈，出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管，又是腎的機能血管，與腎泌尿機能密切相關(guān)。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細血管網(wǎng)：腎小球毛細血管網(wǎng)，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細血管網(wǎng)，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動脈內(nèi)皮細胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細胞之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈內(nèi)皮細胞主要功能有：①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用，②在腎小管的重吸收過程中起重要作用，③保持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
英文名稱 | Human Renal Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 腎組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7259 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人腎動脈內(nèi)皮細胞
組織來源：腎組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人腎動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人腎動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A | Rhesus antibody Rh GGCX γ-谷氨酰羧化酶抗體 規(guī)格 0.2ml |
TIMP-1(Human tissue inhibitor of metal protease 1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IGC： 非洲爪蟾IGC抗體 1ml | C1q(Human Anti-Complement 1q antibody) ELISA Kit 人抗補體1q抗體 96T |
Rhesus antibody Rh rhIL-18 細胞介素18抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-Phospho-Stathmin (Ser38)/FITC 熒光素標記0酸化原癌基因蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser262) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ 96T |
C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 | 豚鼠心肌細胞;GP-H1 |
3T6-Swiss albino細胞，胚胎成纖維細胞 人胰腺癌細胞,CaPan-Ⅱ/Capan-2細胞 CM-M040小鼠肝竇內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | 正常大鼠腎細胞;NRK |
成纖維細胞生長添加物(不含動物成分)FGS-acf | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;Mao |
MS1 小鼠胰島內(nèi)皮細胞 | EndoFectagen? 內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)染試劑盒 |
白牦牛皮膚細胞;Yak-2 橫紋肌瘤細胞，A673細胞 NAMALWA(Butt's 淋巴瘤細胞) | 人腎動脈內(nèi)皮原代細胞C1q(Human Anti-Complement 1q antibody) ELISA Kit 人抗補體1q抗體 96T |
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2 | CTSE Others Mouse 小鼠 CTSE / Cathepsin-E 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H047人肝竇內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 | Rhesus antibody Rh APOA5 載脂蛋白A5抗體 規(guī)格 0.2ml |
beta endorphin： β-內(nèi)啡肽/β endorphin抗體 0.1ml | 大額牛腎細胞;BFR-K1 |
Anti-VWF/FITC 熒光素標記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Porimin： 前細胞脹亡受體誘導膜損傷蛋白抗體 0.2ml |
Anti-CD170/Siglec-5/FITC 熒光素標記唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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