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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜Muller采用膠原酶消化法和反復消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人視網(wǎng)膜Muller經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人視網(wǎng)膜Muller原代細胞 | 組織來源 | 視網(wǎng)膜組織 |
英文名稱 | Human Retinal Muller Cells | 貨號 | YS-01X7421 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人視網(wǎng)膜Muller細胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、節(jié)細胞層、纖維層、內界膜。視網(wǎng)膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個元組成。第一元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強。視網(wǎng)膜Muller細胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質細胞，大約占視網(wǎng)膜膠質細胞的90%，因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關注。在超微結構水平上，Muller細胞的胞質似乎比臨近的其他細胞更高的電子密度，更發(fā)達的內質網(wǎng)，細胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位，Muller細胞形態(tài)也會有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細胞是一種特化的膠質細胞，不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結構和功能的作用，并調制視網(wǎng)膜元活動，還能參與多種病理過程，尤其是眼底增殖性病變，如增生性體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等，體外培養(yǎng)Muller細胞是研究這些增殖性病變途徑之一。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 | Anti-TSHR (CT) 促甲狀腺素受體抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit 人肽基脯酰順反異構酶 96T | Anti-MYL3/Myosin light chain 3 /FITC 熒光素標記肌球蛋白輕鏈3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TIM4 T淋巴細胞膜蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml | PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HCF-1： 宿主細胞因子1抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh CBX1/HP1 β 異染色體同源蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml |
Phospho-FAK (Tyr407)： 0酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml | ADP ELISA Kit 大鼠脂聯(lián)素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人細胞裂解液 (陽性對照) | Promocell C-21110 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 上皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml |
人淋巴細胞;1301 | CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HHpC Pellet 人肝細胞團塊 > 1 mio.cells 人口腔角質細胞總RNAHOK NA | IL6ST Others Mouse 小鼠 IL6ST / CD130 CHO細胞裂解液 (陽性對照) |
CD48 Others Mouse 小鼠 CD48 / BCM1 / SLAMF2 人細胞裂解液 (陽性對照) | SFRP4 Others Mouse 小鼠 sFRP4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
T-101B酶(含100mL 酶解緩沖液)10mL | 人視網(wǎng)膜Muller原代細胞PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
人腎近端小管上皮細胞(HRPTEpiC) MM, 小鼠小膠質細胞 Mouse | 人腦動脈血管平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
A-498(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | Hs 181.Tes細胞，正常人細胞 人癌細胞,HCC1937細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf |
MVK Others Human 人 MVK / Mevalonate kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PSMD9/Bridge-1 /FITC 熒光素標記蛋白酶調解因子9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
KLHDC9： KLHDC9蛋白抗體 0.2ml | TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SPDYA： 細胞周期G2/M期快速誘導蛋白SPDYA抗體 0.2ml | CNDP1： 肌肽二肽酶1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml | ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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