化工儀器網
詳細介紹
人輸尿管平滑肌原代細胞
人輸尿管平滑肌細胞分離自輸尿管組織；輸尿管上接腎盂，下連膀胱，是一對細長的管道，呈扁圓柱狀，位于腹膜后，為一肌肉粘膜所組成管狀結構，沿腰大肌內側的前方垂直下降進入骨盆。輸尿管有三個狹窄部：一個在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處)；一個在越過小骨盆入口處；后一個在進入膀胱壁的內部。這些狹窄是結石及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結構，即瓦耳代爾鞘，它能有效地防止膀胱內尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段，也可稱為腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動脈處；盆段，自髂動脈到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁內斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層，黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮，約有4-5層細胞；固有層由細密的結締組織構成，內含膠原纖維和少量彈性纖維；輸尿管肌層主要由內縱和外環(huán)兩層平滑肌組成；外膜為疏松結締組織，營養(yǎng)血管由外膜進入輸尿管。輸尿管有較厚的平滑肌層，可作節(jié)律性的蠕動，使尿液不斷的流入膀胱。因此對輸尿管平滑肌運動的研究，是尿動力學的重要研究方向。
英文名稱 | Human Ureteral Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 尿道 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7895 |
細胞形態(tài) | 長梭形 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人輸尿管平滑肌細胞
組織來源：尿道
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：基礎培養(yǎng)基，含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：長梭形
傳代特性：可傳3-5代左右，3代以內狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人輸尿管平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的人輸尿管平滑肌采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的人輸尿管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
人臍靜脈平滑肌細胞 人胚肺細胞，NCI-H1563[H1563]細胞 MLTC-1(間質細胞瘤細胞) | Rhesus antibody Rh GFR Alpha-1 GDNF家族受體α-1抗體 規(guī)格 0.1ml |
Human lung cancer Marker ELISA Kit 人肺癌標志物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
Integrin Alpha 3 + Beta 1： 整合素α3β1抗體 0.2ml | LPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶 96T |
Rhesus antibody Rh RHCE Rh血型C抗原抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Phospho-LAT (Tyr191) /FITC 熒光素標記0酸化T細胞活化連接蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser202) 0酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | ANG-4(Mouse Angiopoietin 4) ELISA Kit 小鼠血管生成素4 96T |
白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2 | 山羊皮膚成纖維樣細胞;DG-S1 |
小鼠黑色素瘤瘤株;B16 小鼠皮膚肥大細胞培養(yǎng)基 100mL | H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源) Rattus |
CL-0390NCI-H1703(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 | DH82 狗腎惡性組織細胞增生癥細胞 |
卵巢微血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | SMCFectagen? 平滑肌細胞轉染試劑盒 |
人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH7 大鼠表皮角化細胞培養(yǎng)基 100mL | 人輸尿管平滑肌原代細胞LPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶 96T |
AE-2 雜交瘤細胞抗 AChE | RTN4R Others Mouse 小鼠 Nogo Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) |
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H053人子宮平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL |
NOG Protein Human 重組人 Noggin / NOG 蛋白 (Fc 標簽) | Rhesus antibody Rh APOA2 載脂蛋白A2抗體 規(guī)格 0.1ml |
Bim： 細胞死亡調解子抗體 0.1ml | 牦牛皮膚細胞;BMU-S1 |
Anti-Tenascin C/FITC 熒光素標記固生蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PSME3： 蛋白酶體激活因子PA28γ抗體 0.2ml |
Anti-CD184/CXC-R4/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2 |
化工儀器網