化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
人外周血單核原代細胞
人外周血單核細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞，并在骨髓中發(fā)育。當它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。與其他血細胞比較，單核細胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強的吞噬作用。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中，細胞體積繼續(xù)增大，直徑可達50-80μm，細胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多，成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素，參與機體防衛(wèi)機制，還產(chǎn)生一些能促進內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞生長的因子。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂，并包圍異物。
英文名稱 | Human Peripheral Blood Monocyte Cells | 組織來源 | 外周血 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7551 |
細胞形態(tài) | 圓形、巨噬細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人外周血單核細胞
組織來源：外周血
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細胞形態(tài) 圓形、巨噬細胞樣
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人外周血單核采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
T-CEM細胞，人T細胞白血病細胞 615小鼠肺癌瘤株,HP615細胞 MesenFectagen? 間充質(zhì)干細胞轉染試劑盒 | Rhesus antibody Rh GFP 綠色熒光蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
HSCCAg-2(uman Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit 人鱗狀上皮細胞癌抗原2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
ICAD： Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體 0.1ml | EMAb(Human eye muscle antibody) ELISA Kit 人抗眼肌抗體 96T |
Rhesus antibody Rh RGS5 G蛋白信號轉導調(diào)節(jié)因子5抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Phospho-LATS1 (Thr1079) /FITC 熒光素標記0酸化抑制基因LATS1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-Talin (Ser425) 0酸化踝蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml | MBP ELISA Kit 大鼠主要堿性蛋白 96T |
NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | CM-R026大鼠骨髓基質(zhì)細胞培養(yǎng)基100mL |
MKN-45細胞，人低分化胃癌細胞 人母細胞瘤細胞,BE(2)C細胞 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2 | CRFK(貓腎細胞) 5×106cells/瓶×2 |
II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL | IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 標簽) |
腎上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人腦血管平滑肌細胞裂解物HBVSMCL |
TE-1人食管癌細胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 人外周血單核原代細胞EMAb(Human eye muscle antibody) ELISA Kit 人抗眼肌抗體 96T |
CL-0043C127(小鼠癌細胞)5×106cells/瓶×2 | PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
PRKD3 Others Human 人 PKC nu / PRKD3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H057人卵巢微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL |
小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞;DCS | Rhesus antibody Rh APOA1 載脂蛋白A1抗體 規(guī)格 0.1ml |
Bcl-2 beta： Bcl2 beta蛋白抗體 0.2ml | 綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞;U14-GFP |
Anti-CD14/Biotin 化CD14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Pancreatic Lipase： 胰脂肪酶抗體 0.1ml |
Anti-CD229/SLAMF3/FITC 熒光素標記CD229抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
化工儀器網(wǎng)