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詳細(xì)介紹
人微血管周原代細(xì)胞
人微血管周細(xì)胞分離自微血管組織；周細(xì)胞（pericyte）又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞，是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞，可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中，通過物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊，監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外，周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一，所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜，基膜上有多種細(xì)胞連接，包括多種整合素、鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控；毛細(xì)血管受損時(shí)，周細(xì)胞還可增殖，分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。
英文名稱 | Human Microvascular Pericyte Cells | 組織來源 | 微血管組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7515 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人微血管周細(xì)胞
組織來源：微血管組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人血管周采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人微血管周經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
心室肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | NHLRC3： 非霍奇金淋巴瘤重復(fù)蛋白3抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MCP1/CCL2 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-Trk C/FITC 熒光素標(biāo)記酪激酶C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
MAP-2(microtubule associated protein 2) 微管相關(guān)蛋白2抗原 0.5mg | Anti-ompF(putative outer membrane porin F protein) 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml |
Anti-phospho-GAB2 (Tyr643) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化接頭蛋白Gab2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC29A4 腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-peripherin/FITC 熒光素標(biāo)記外周蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-ASK1/MAPKKK5 /FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/原活化蛋白激酶激酶激酶5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
IgG3 Others Human 人 IgG3-Fc / IGHG3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 人肝永生化細(xì)胞;THLE-3 人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人口腔角質(zhì)細(xì)胞RNAHOK miRNA5 μg | REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
FETUB Others Mouse 小鼠 FETUB / Fetuin-B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | EPHA4 Others Human 人 EphA4 / HEK8 (aa 570-986) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
INSR Others Human 人 Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Long Isoform ) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | IgG2 Others Human 人 IgG2-Fc (257 Ser/Ala) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1 | 人微血管周原代細(xì)胞Anti-ompF(putative outer membrane porin F protein) 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml |
MAP2K4 Others Mouse 小鼠 MKK4 / MEK4 / MAP2K4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 細(xì)胞名稱 種屬 |
鹽溶液HBSS | KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
MLTC-1細(xì)胞，間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞,NCI-N87細(xì)胞 婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-4 | Gastrin： 胃泌素/蛙皮素抗體 0.1ml |
Human Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 人血纖蛋白原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白抗體 Anti-Klf4 0.1ml | CRF(Human corticotropin-releasing factor) ELISA Kit 人促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子 96T |
ABAT： γ基轉(zhuǎn)酶抗體 0.1ml | IgG3 Others Human 人 IgG3-Fc / IGHG3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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