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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜基質(zhì)采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細胞 | 組織來源 | 子宮組織 |
英文名稱 | Human Endometrial Stromal Cells | 貨號 | YS-01X7619 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細胞和纖毛細胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細胞，稱為基質(zhì)細胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的內(nèi)層，位于子宮腔面，在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
OS-732細胞，骨肉瘤細胞(瘤株) 人細胞,SiHa細胞 人脊髓星形膠質(zhì)細胞總RNAHA-sp NA | Hyp ELISA Kit 大鼠羥脯酸 96T |
RNF138： 環(huán)指蛋白138抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh PUS10/CCDC139 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白139抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-HDAC12/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?；?span>12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C17orf53： 17號染色體開放閱讀框53抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BRCA1/BAP1 癌易感基因1抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-GCP-2/CXCL6 /FITC 熒光素標(biāo)記抗粒細胞趨化蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
FasL抗體 Anti-FasLAnti-FasL 0.1ml | phospho-ADAM17 (Thr735)： 0酸化CD156b抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細胞系/IgR;VERO/IgR | 人關(guān)節(jié)軟骨細胞培養(yǎng)基 100mL |
Vero細胞，綠猴腎細胞 RSC96(大鼠雪旺細胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180 | EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 |
大鼠小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)基 100mL | 白細胞介素-1超家族 |
原代腎實質(zhì)細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | CL-0104HEp-2(人喉表皮樣癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
CRFK貓腎細胞 CRFK feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 人子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細胞C17orf53： 17號染色體開放閱讀框53抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細胞;VERO C1008 (E6) | CL-0434SC-1(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2 |
CLEC4A Others Human 人 DCIR / CLEC4A / CLECSF6 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞;ERA-2 |
人胚胎胰腺組織來源細胞;CCC-HPE-2 | IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.3ml |
Rhesus antibody Rh GRM4/mGluR4 促代謝型谷受體4抗體 規(guī)格 0.1ml | 人絨癌細胞;JEG-3 |
ERp72： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp72抗體 0.2ml | Anti-Iumbrokinase 抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
MHC I /H-2 I (Mouse major histocompatibility complex I ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | 非洲綠猴腎細胞系/IgR;VERO/IgR |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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