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兔附睪上皮原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-16 09:43:51瀏覽次數(shù):47

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8345 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔附睪上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代肝枯否細(xì)胞 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞 英文名稱: MS1 人內(nèi)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 人內(nèi)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 淋巴內(nèi)皮細(xì)胞 人原代腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

兔附睪上皮原代細(xì)胞

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔附睪上皮采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的兔附睪上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔附睪上皮原代細(xì)胞

組織來源


英文名稱

Rabbit Epididymal Epithelial   Cells

貨號

YS-01X8345

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

兔附睪上皮原代細(xì)胞
細(xì)胞簡介:

兔附睪上皮細(xì)胞分離自附睪組織;附睪(Epididymis)是一個(gè)由曲折、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官,一端接著輸精管(Ductusdeferens),一端接著睪丸(Testis)的曲細(xì)精管,具體結(jié)構(gòu)主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣,可分為頭、體、尾三部。離開睪丸后通過輸出小管進(jìn)入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養(yǎng)的功能,以促進(jìn)的進(jìn)一步成熟附睪的功能是暫存,促進(jìn)的進(jìn)一步成熟。在附睪內(nèi)獲得運(yùn)動(dòng)能力,總共停留817天,終達(dá)到功能上的成熟。在這個(gè)過程中,除了自身的因素,還受到附睪微環(huán)境的影響,這包括了一系列的物理、化學(xué)變化和形態(tài)的改變??梢哉f,附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發(fā)生異常,則不能成熟,引起不育。附睪上皮含有主細(xì)胞、基細(xì)胞、亮細(xì)胞等幾種類型細(xì)胞。基細(xì)胞,其頂部離附睪管腔有一定距離,在附睪各部分,其形態(tài)沒有差別,一般認(rèn)為是貯備細(xì)胞;另一種主細(xì)胞,是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ),在各區(qū)段的主細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)差別很大,這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異。除上皮細(xì)胞外,附睪的管壁組織結(jié)構(gòu)也有規(guī)律性的變化,附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮,而尾部平滑肌就沒有這種特點(diǎn),僅在射精一瞬間出現(xiàn)強(qiáng)烈的節(jié)律收縮。作為負(fù)責(zé)提供適合成熟微環(huán)境的附睪,具有活躍的分泌與吸收功能。其中,附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉(zhuǎn)運(yùn),對保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和酸堿度,為成熟提供適宜的環(huán)境起著相當(dāng)重要的作用。睪丸的支持細(xì)胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液,如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液,而從附睪排出的只不過幾百微升,也就是說睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內(nèi)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,結(jié)扎輸精管時(shí)睪丸不會(huì)腫脹,但若結(jié)扎睪丸輸出小管,睪丸第二天就會(huì)腫脹,這就充分證實(shí)了附睪存在著強(qiáng)有力的吸收功能,但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細(xì)胞對的發(fā)育、成熟,附睪生理基礎(chǔ)功能研究具有重要意義。

培養(yǎng)信息:

兔附睪上皮原代細(xì)胞

包被條件:鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、TransferrinSelenium Solution、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔附睪上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔附睪上皮原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔附睪上皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

公司產(chǎn)品:兔附睪上皮原代細(xì)胞

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1

IFI16/p16 ELISA Kit 大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

C10orf62 10號染色體開放閱讀框62抗體   0.2ml

phospho-GABRG2(Ser366) 0酸化γ基γ2受體抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh CDX2/3 尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2/3抗體 規(guī)格 0.2ml

PRC1: 胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體 0.1ml

Anti-NR1/NMDAR1/FITC 熒光素標(biāo)記谷受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

FABP(brain) (Fatty acid-binding   protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原 0.5mg

IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗雞IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格:   2ml

MUSK: 肌肉骨骼受體酪酸激酶抗體 0.1ml

C10ORF54 Others Human B7-H5 / Gi24 / VISTA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CRT(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-sp

IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0922 人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

SW 1088[SW-1088;SW1088]細(xì)胞,人腦星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞   人腎癌細(xì)胞,OS-RC-2細(xì)胞 氣管上皮細(xì)胞Many types of   cells包裝:5 × 105次方(1ml)

HUM, 正常人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

兔附睪上皮原代細(xì)胞PRC1: 胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體 0.1ml

Jurkat E6-1細(xì)胞,人T細(xì)胞淋巴瘤 人癌細(xì)胞,4T1細(xì)胞 上皮細(xì)胞生長添加物-2EpiCGS-2

人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84

小鼠畸胎瘤細(xì)胞;F9

LILRB1 Others Human LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H2087(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2   Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞)

Anti-IL-17RC/IL-17RL/FITC 熒光素標(biāo)記白介素17受體C抗體IgGMulti-class   antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-S100A1 S100A1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP 小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

Rhesus antibody Rh   phospho-ITGB3(Tyr785) 0酸化整合素β3抗體 規(guī)格 0.1ml

Rhesus antibody Rh KIF4A 沉默驅(qū)動(dòng)蛋白KIF4A抗體 規(guī)格 0.2ml

Annexin A2 human c ELISA Kit 人膜粘連蛋白   Ⅱ ELISA 試劑盒 96T

C10ORF54 Others Human B7-H5 / Gi24 / VISTA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

 



操作步驟:

兔附睪上皮原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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