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詳細介紹
兔肝動脈內(nèi)皮原代細胞
兔肝動脈內(nèi)皮細胞分離自肝動脈組織；在胚胎期，肝臟有3條動脈供血，分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈，這3條動脈分別肝臟的不同部位。出生后，一般保留一條動脈，大部分為起源于腹腔動脈的動脈，由其分出左、右肝動脈左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況，如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈（25%），起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈（10%），而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外，還有5%像胚胎期一樣，3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈，如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時，此種異位起源的肝動脈稱替代動脈，如果在常見肝動脈類型外，還有一支這種異位起始的動脈肝臟的一部分血流，這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈內(nèi)皮細胞是襯于肝動脈內(nèi)表面的單層扁平上皮，在炎癥時高表達黏附分子，與血流中白細胞表面黏附分子相互作用，從而介導白細胞穿越血管壁，亦屬一類非專職抗原提呈細胞。它們吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織，還參與集體免疫活動，包括：①血管收縮及血管舒張，從而控制血壓；②凝血（血栓形成及纖維蛋白溶解）；③動脈硬化；④血管生成；⑤炎癥及腫脹（浮腫）；⑥內(nèi)皮細胞亦控制一些物質(zhì)，如白血球進出血管。
英文名稱 | Rabbit Hepatic Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 肝動脈 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8348 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔肝動脈內(nèi)皮細胞
組織來源：肝動脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肝動脈內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔肝動脈內(nèi)皮采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔肝動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] | Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) 0酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人0酯酶Cγ鏈 96T | Anti-Moesin/FITC 熒光素標記膜突蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Thrombospondin 2 血小板反應蛋白2/敏感蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml | AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HAS2： 透明質(zhì)酸合成酶2抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗體 規(guī)格 0.1ml |
phospho-FOXO4 (Thr451)： 0酸化叉頭蛋白4抗體 0.1ml | TSH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293sars181A 人膀胱上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
人急性早幼粒白血病細胞;HL-60 | PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) | DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照) |
LYPD3 Others Mouse 小鼠 LYPD3 / MIG-C4 人細胞裂解液 (陽性對照) | COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 | 兔肝動脈內(nèi)皮原代細胞AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
KU812(人外周血嗜堿性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人間充質(zhì)干細胞-肝 |
人上皮細胞;MCF-10A | 非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4- 畸胎瘤細胞，F9細胞 BEL-7404(肝癌細胞) |
CD63 Others Sus scrofa (Pig) 野豬 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-Rad52/FITC 熒光素標記Rad52抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
osteopontin： 骨橋蛋白抗體(分泌型0蛋白1) 0.1ml | CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SorLA/LRP9： 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白9抗體 0.2ml | phospho-CDC27 (Thr244)： 0酸化后期促進復合蛋白3抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml | EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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