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兔腎小球內(nèi)皮原代細胞

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更新時間:2025-05-18 16:25:04瀏覽次數(shù):63

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7957 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔腎小球內(nèi)皮原代細胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代淋巴管內(nèi)皮細胞 BT-549(人管癌細胞) TE-1 人食管癌細胞 1ml/T75 H4 人膠質(zhì)細胞瘤 MKN45-PTBP3-pslience 空質(zhì)粒 人胃癌PTBP3空白對照細胞株 小鼠原代胃平滑肌細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

兔腎小球內(nèi)皮原代細胞

方法簡介

實驗室分離的兔腎小球內(nèi)皮采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化,結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔腎小球內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔腎小球內(nèi)皮原代細胞

組織來源

英文名稱

Rabbit Glomerular Endothelial Cells

貨號

YS-01X7957

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

兔腎小球內(nèi)皮細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內(nèi)皮細胞是一類特殊微血管類型的細胞。細胞為圓形、多角形,單層貼壁生長;細胞質(zhì)豐富,細胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細胞被覆于腎小球毛細血管壁腔側(cè),與血流直接接觸,是腎小球濾過膜的第一道屏障,可粘附細菌和白細胞,修復(fù)基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細胞在免疫學和病理生理學領(lǐng)域中具有重要的研究價值。

培養(yǎng)信息:

兔腎小球內(nèi)皮原代細胞

包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔腎小球內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔腎小球內(nèi)皮原代細胞

操作步驟:

兔腎小球內(nèi)皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

兔腎小球內(nèi)皮原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

兔腎小球內(nèi)皮原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

公司產(chǎn)品:兔腎小球內(nèi)皮原代細胞

FC33細胞,Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞 小鼠垂體細胞,MPC細胞 人臍動脈內(nèi)皮細胞

酸化細胞死亡調(diào)解子抗體

酸化活化T細胞核因子5蛋白抗體

轉(zhuǎn)運蛋白G3PP抗體

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體

酸化乳腺癌易感基因1抗體(人)

轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體

酸化細胞死亡調(diào)解子抗體

酸化乳腺癌易感基因1抗體(人)

轉(zhuǎn)運蛋白G3PP抗體

HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

豬腎傳代細胞;IBRS-2

LS180細胞,人結(jié)腸腺癌細胞 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞,MuM-2B細胞 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]

HGC-27(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人子宮頸上皮細胞培養(yǎng)基 100mL

CXCL12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 標簽)

人間充質(zhì)干細胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg

兔主動脈平滑肌細胞;SMC

Yac-1細胞,小鼠淋巴瘤細胞 PA317(成纖維細胞) 人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C

兔腎小球內(nèi)皮原代細胞酸化乳腺癌易感基因1抗體(人)

人羊膜細胞;WISH

SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照)

143TK細胞,人胸腺激酶缺陷性細胞系 鼠沙門氏菌Ta100 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1

小鼠腎足突細胞培養(yǎng)基 100mL

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1

酸化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體

轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體

CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽)

酸化活化T細胞核因子5蛋白抗體

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體

酸化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體

HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

 





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