化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
兔視網(wǎng)膜前體原代細胞
兔視網(wǎng)膜前體細胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、節(jié)細胞層、纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個元組成。第一元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強。
英文名稱 | Rabbit Retinal Precursor Cells | 組織來源 | 視網(wǎng)膜 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8435 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔視網(wǎng)膜前體細胞
組織來源：視網(wǎng)膜
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：半貼壁半懸浮
細胞形態(tài)：圓形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔視網(wǎng)膜前體細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔視網(wǎng)膜前體采用消化法結合專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔視網(wǎng)膜前體經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓 小鼠精母細胞，GC-2spd細胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮細胞) | 酸化細胞信號轉導分子SMAD3抗體 |
酸化活化轉錄因子4抗體 | 滋養(yǎng)層細胞抗原3β7抗體 |
重組白細胞介素18抗體 | 酸化三羥基三甲基A還原酶抗體 |
轉錄輔助因子退變樣蛋白3抗體 | 酸化細胞信號轉導分子SMAD3抗體 |
酸化三羥基三甲基A還原酶抗體 | 滋養(yǎng)層細胞抗原3β7抗體 |
人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7 | 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3 |
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1 酶-EDTA(含10mL 酶解緩沖液) 1mL | MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細胞 Human |
雪旺細胞培養(yǎng)基SCM | HHCC(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞 | CL-0170NG108-15(小鼠細胞瘤與大鼠膠質瘤之融合細胞)5×106cells/瓶×2 |
PC-3M 1E8細胞，人前列腺癌細胞高轉移亞系 大鼠垂體瘤細胞,MMQ細胞 人扁桃體上皮細胞HTEpiC | 兔視網(wǎng)膜前體原代細胞酸化三羥基三甲基A還原酶抗體 |
肺動脈成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | MKN-45細胞，人低分化胃癌細胞 人母細胞瘤細胞,BE(2)C細胞 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2 |
小鼠星形膠質細胞(MA)(5×105) CaEs-17, 人食管癌細胞株 Human | EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0907 |
II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL | 酸化轉錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 |
轉錄輔助因子退變樣蛋白3抗體 | 人腎癌Wilms細胞;G401 |
酸化活化轉錄因子4抗體 | 重組白細胞介素18抗體 |
酸化轉錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 | 人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7 |
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