化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
兔視網(wǎng)膜微血管周原代細(xì)胞
兔視網(wǎng)膜血管周細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜微血管組織；周細(xì)胞（pericyte）又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞，是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞，可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中，通過物理接觸和旁分泌信號與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊，監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外，周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點之一，所以對血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個基膜，基膜上有多種細(xì)胞連接，包括多種整合素、鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控；毛細(xì)血管受損時，周細(xì)胞還可增殖，分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。
英文名稱 | Rabbit Retinal Microvascular Pericyte Cells | 組織來源 | 視網(wǎng)膜 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8437 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞
組織來源：視網(wǎng)膜
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔視網(wǎng)膜血管周采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔視網(wǎng)膜微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
TE-1細(xì)胞，人食管癌細(xì)胞 人腦瘤細(xì)胞,SF17細(xì)胞 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S3 | 酸化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體 |
酸化肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 | 子宮內(nèi)膜抗體 |
重組葡萄球菌蛋白A抗體 | 酸化上皮鈣粘附分子抗體 |
轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體 | 酸化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體 |
酸化上皮鈣粘附分子抗體 | 子宮內(nèi)膜抗體 |
Caki-1(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 狗骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells |
U87MG細(xì)胞，人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 雜色曲霉 人氣管上皮細(xì)胞RNAHTEpiC miRNA5 μg | SF17(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
前體細(xì)胞培養(yǎng)基NsM | 豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01 |
CM-M045小鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 人無色素睫狀上皮細(xì)胞裂解物HNPCEpiCL |
SJCRH30[RC13;RMS 13;SJRH30]細(xì)胞，人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞 人腎癌細(xì)胞系,A498細(xì)胞 人食道平滑肌細(xì)胞HESMC | 兔視網(wǎng)膜微血管周原代細(xì)胞酸化上皮鈣粘附分子抗體 |
人肝癌細(xì)胞;SMMC-7721 | 人胚肺二倍體細(xì)胞;HL 人小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
TNFRSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BB / TNFRSF9 / CD137 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CM-M010小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
猴源細(xì)胞 | 酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體 |
轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體 | CM-R042大鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
酸化肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 | 重組葡萄球菌蛋白A抗體 |
酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體 | Caki-1(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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