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兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞

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  • 型號

  • 品牌

    上研生
  • 廠商性質

    經(jīng)銷商
  • 所在地

    上海市

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更新時間:2025-05-19 13:05:44瀏覽次數(shù):43

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7863 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代外周血來源內皮祖細胞 GBC-SD(人膽囊癌細胞) BEL-7405 人肝癌細胞 1ml/T75 KG-1 人髓性紅白血病細胞 NCI-H292 人肺癌細胞(淋巴結轉移) 小鼠原代胚胎成纖維細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞

方法簡介

實驗室分離的兔下丘腦元采用消化法結合元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔下丘腦元經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞

組織來源

英文名稱

Rabbit Hypothalamic   Neuron Cells

貨號

YS-01X7863

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞
細胞簡介:

兔下丘腦元細胞分離自下丘腦;下丘腦又稱丘腦下部,位于大腦腹面、丘腦的下方,是調節(jié)內臟活動和內分泌活動的較高級中樞所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部(又名視前區(qū)和視上區(qū))﹑中部(結節(jié)區(qū))和后部(乳頭體區(qū))。下丘腦具有許多細胞核團和纖維束﹐與中樞系統(tǒng)的其它部位具有密切的相互聯(lián)系。它不僅通過和血管途徑調節(jié)腦垂體前﹑后葉激素的分泌和釋放﹐而且還參與調節(jié)自主系統(tǒng)﹐如控制水鹽代謝﹑調節(jié)體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內臟活動以及情緒等。下丘腦元與來自其他部位的纖維有廣泛的突觸聯(lián)系,可以接受很多沖動,為內分泌系統(tǒng)和系統(tǒng)的中心。它們能調節(jié)垂體前葉功能,合成垂體激素及控制自主和植物功能。故提取下丘腦元進行體外培養(yǎng),建立下丘腦元體外實驗平臺具有重要意義。

培養(yǎng)信息:

兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞

包被條件:PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):元細胞樣

傳代特性:屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

兔下丘腦元細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

公司產(chǎn)品:兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞

小膠質細胞生長添加物MGS

抑制素A/Inhibin βA抗體

ETS結構域轉錄因子FEV抗體

細胞表面趨化因子受體7抗體

CD344抗體

丙蛋白激酶C底物Marcks抗體

原癌蛋白CBL2抗體

核糖體RNA合成蛋白42抗體

2號染色體開放閱讀框53抗體

22號染色體開放閱讀框28抗體

EGFL7 Others Mouse 小鼠 EGFL7 / VE-statin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell   GrowthMedium 2,, 平滑肌細胞生長培養(yǎng)基2(即用型) 500ml

人肺動脈內皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg

MTDH Others Human MTDH / lyric / metadherin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

22RV1(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H043人肝實質細胞培養(yǎng)基100mL 人骨骼肌成肌細胞RNAHSkMM miRNA5 μg

NP Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人小細胞肺癌細胞;NCI-H209 大鼠肺大靜脈內皮細胞培養(yǎng)基 100mL

NHEM.f M2 Pellet 正常人表皮黑素細胞團塊(少年者),培養(yǎng)在M2培養(yǎng)液中 > 1 mio.cells 人氣管上皮細胞裂解物HTEpiCL

CM-R095大鼠成年表皮角質形成層細胞培養(yǎng)基100mL

兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞丙蛋白激酶C底物Marcks抗體

SkMC-c 人骨骼肌細胞(SkMC)   500,000cells 心臟微血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

雜交瘤(B);Z1510A2G6A2F8

人細胞;Hela 229 [HeLa229]

猴源細胞 T細胞白血病,6T-CEM細胞 COLO-320(結腸腺癌細胞)

CLDN11 Others Human CLDN11 / Claudin-11 人細胞裂解液 (陽性對照)

3號染色體開放閱讀框54抗體

細胞特異性轉錄因子LDB1抗體

JAR(人胎盤絨毛膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2 MG-63, 人骨肉瘤細胞 人胃腺癌細胞;BGC-823

BRD1蛋白抗體

碘轉運體蛋白抗體

生長激素釋放激素抗體

EGFL7 Others Mouse 小鼠 EGFL7 / VE-statin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

 


操作步驟:

兔下丘腦神經(jīng)元原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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