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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔嗅鞘采用-膠原酶聯合消化法、結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔嗅鞘經GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔嗅鞘原代細胞 | 組織來源 | 嗅球 |
英文名稱 | Rabbit Olfactory Ensheathing Cells | 貨號 | YS-01X8459 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔嗅鞘細胞分離自嗅球組織；嗅鞘細胞（OECs）是在功能上介于施旺細胞和少突膠質細胞之間的一種特殊的膠質細胞，具有營養(yǎng)、抑制膠質增生、瘢痕形成、成鞘作用等；為軸突生長提供了適宜的微環(huán)境及較強的遷移的特性，使其成為促進中樞再生的理想候選細胞之一。嗅鞘細胞是目前所發(fā)現的極少數的中樞系統(tǒng)可以再生細胞之一，其特點為終身具有再生功能，還能夠釋放多種營養(yǎng)因子、粘附分子。被認為是髓鞘化能力強的膠質細胞，逐漸用于治療脊髓損傷。嗅鞘細胞與膠質細胞、雪旺細胞在表現型上有共同點，它們都能促進軸突的再生，主要區(qū)別在于嗅鞘細胞不但存在于中樞系統(tǒng)，也存在于外周中。嗅鞘細胞被認為是一種可塑性很高的細胞，它可表現出多種細胞形態(tài)和細胞表面標志，在嗅系統(tǒng)發(fā)育過程中，嗅鞘細胞根據其在組織定位的不同而有不同的抗原表型，其中P75NTR、GFAP、和O4可標記大部分在體嗅鞘細胞，然而在嗅球外層O4陽性嗅鞘細胞仍然可以在P75NTR陽性細胞層內分化成E-NCAM陽性的細胞層，還有一定比率的嗅鞘細胞P75NTR陰性而NY和S100表型為陽性。嗅黏膜中的元是生后才生長并在成年時繼續(xù)分化的元，壽命為4-12周，隨著新細胞的生長，又建立了新的支配關系。嗅鞘細胞存在于嗅及嗅球的層上，沿嗅的全長，從周圍系統(tǒng)到中樞分布。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：元、上皮細胞樣
傳代特性：可傳1代，不建議傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔嗅鞘細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
細胞衰老檢測試劑盒CSA | 整合素β7抗體 |
酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體 PPARγ | 細胞骨架相關蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體 |
酸化叉頭蛋白4抗體 | 膜相關環(huán)指蛋白2抗體 |
CD329抗體 | 染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體 |
22號染色體開放閱讀框13抗體 | 絲蛋白酶抑制劑13抗體 |
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照) | B16-F1(小鼠黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人星形膠質細胞HA |
人肺成纖維細胞cDNAHPF cDNA | PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H059人子宮頸上皮細胞培養(yǎng)基100mL 人肝內膽管上皮細胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
IL1RAPL1 Others Human 人 IL1R8 人細胞裂解液 (陽性對照) | TNK2 Others Human 人 ACK1 / TNK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-R079大鼠冠狀動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | 兔嗅鞘原代細胞膜相關環(huán)指蛋白2抗體 |
GPX7 Others Human 人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 人細胞裂解液 (陽性對照) | HBL-100(人整合SV40基因的上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人EB病毒轉化的B細胞;CGM1 | PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 人細胞裂解液 (陽性對照) |
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2 7721肝癌細胞，7721細胞 HuT78(T淋巴細胞白血病細胞) | 細胞角蛋白4抗體 |
富含亮重復跨膜元蛋白3抗體 | PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
BTB/POZ結構域蛋白19抗體 | 谷受體3A+3B抗體 |
胃泌素/蛙皮素抗體 | ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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