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小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-20 11:06:08瀏覽次數(shù):58

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X7485 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代頜骨成纖維細(xì)胞 NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) Lu-165 人肺腺癌細(xì)胞 1ml/T75 人少突膠質(zhì)細(xì)胞 RabbitK3 兔上皮樣細(xì)胞 大鼠原代視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠星形膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞

組織來(lái)源

腦組織

英文名稱

Mouse Astrocyte   cells

貨號(hào)

YS-01X7485

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。星形膠質(zhì)細(xì)胞,是哺乳動(dòng)物腦內(nèi)分布廣泛的一類細(xì)胞,也是膠質(zhì)細(xì)胞中體積大的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(shù)(銀染色)顯示此類膠質(zhì)細(xì)胞呈星形,從胞體發(fā)出許多長(zhǎng)而分支的突起,伸展充填在細(xì)胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔細(xì)胞的作用。細(xì)胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足,有些腳板貼附在鄰近的毛細(xì)血管壁上,因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足,靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面,彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜。細(xì)胞剛分離時(shí)呈圓形,24h后大部分細(xì)胞貼壁,均勻分布于瓶底,部分細(xì)胞伸出細(xì)小突起,培養(yǎng)4-5d后細(xì)胞數(shù)量明顯增多,呈扁平、多角形,胞質(zhì)豐富且核漿較少,細(xì)胞核呈橢圓形,偏于胞體一側(cè)。星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞系統(tǒng)的重要細(xì)胞組成,不僅具有支持功能,還能夠合成及分泌多種活性物質(zhì),在維持元內(nèi)外環(huán)境、生存、遷移、免疫調(diào)節(jié)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、軸突生長(zhǎng)及功能整合等方面具有重要作用。

培養(yǎng)信息:

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

公司產(chǎn)品:小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞

軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)添加物CGS

白介素11受體α/IL-11Rα抗體

PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK8蛋白抗體

軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體

胚胎干細(xì)胞RAS蛋白抗體

黑素皮質(zhì)素受體5抗體

2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框71抗體

酶動(dòng)力蛋白2抗體

酸化細(xì)胞角蛋白8抗體

羥類固醇脫氫酶17β3抗體

EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人齒根膜韌帶成纖維細(xì)胞(HPDLF)( 5×105 ) rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Rattus

婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-3

ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

ICAM2 Others Human CD102 / ICAM2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CPLX3 Others Human CPLX3 / Complexin 3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Hela 299(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2EpiCM-2

HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素   (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-H069人膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞黑素皮質(zhì)素受體5抗體

8. 骨骼肌細(xì)胞系統(tǒng)

敘利亞倉(cāng)鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1

人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HIMECL

A-431(人表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H131人角膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人羊膜細(xì)胞;HA

小鼠淋巴瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

過(guò)敏毒素C4/補(bǔ)體C4抗體

生物鐘KAT13D蛋白抗體

CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體

酸化細(xì)胞核分離基因C蛋白抗體

腸和大腦特定同源蛋白1抗體

EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

 


操作步驟:

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)原代細(xì)胞
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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