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小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-20 11:11:05瀏覽次數(shù):54

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7247 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代肌腱成纖維細(xì)胞 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞) NCI-H596 人肺腺鱗癌細(xì)胞 1ml/T75 QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞 Human SF9 晚秋粒蟲細(xì)胞 大鼠原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎皮質(zhì)上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎皮質(zhì)上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞

組織來源

腎組織

英文名稱

Mouse Renal   Cortical Epithelial Cells

貨號

YS-01X7247

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞
細(xì)胞簡介:

小鼠腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。

培養(yǎng)信息:

小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞

包被條件 鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

公司產(chǎn)品:小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞

軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

干擾素α受體2抗體

PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK4蛋白抗體

肌動蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體

癌基因ETS2抗體

肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體

嘧啶c氧化酶IV亞型1抗體

Erdj5/DNAJC10蛋白抗體

1號染色體開放閱讀框149抗體

重組瘤病毒抗體

JTB Others Human Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細(xì)胞裂解液   (陽性對照)

Promocell C-24305 Melanocyte Growth   Medium M2 (prf), 黑色素細(xì)胞生長培養(yǎng)基M2型套裝,無酚紅 500ml

平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf

HDAC3 Others Human HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞( Hac) (1×106 ) 小鼠干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)   Mouse

TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞   人肺腺癌細(xì)胞,GLC-82細(xì)胞 肺癌組織源性原代細(xì)胞Many types   of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml

CM-H065人輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體

NCI-H209細(xì)胞,人小細(xì)胞肺癌   人癌抗雌激素耐藥株,LCC9細(xì)胞 上皮細(xì)胞生長添加物MEpiCGS

人腦血管平滑肌細(xì)胞

倉鼠卵巢細(xì)胞;Lec1

CD3D & CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 /   恒河猴 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

分子伴侶復(fù)合體TCP-1β抗體

電壓門控性鉀通道Kv2.2抗體

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4 I型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

蛋白BOC抗體

核孔蛋白NUP160抗體

谷受體1抗體

JTB Others Human Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細(xì)胞裂解液   (陽性對照)

 


操作步驟:

小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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