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小鼠腎足突原代細胞
小鼠腎足突細胞分離自腎組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細胞（podocyte）即腎小囊臟層上皮細胞，它附著于腎小球基底膜（GBM）的外側，連同GBM和毛細血管內皮一起構成了腎小球血液濾過屏障。足細胞特殊的解剖位置，使得其體內研究較為困難；又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養(yǎng)的原代細胞不能增殖。足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突（FP），呈指狀交叉復蓋于GBM外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分，IV型膠原和纖維連接蛋白（FN）；在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質金屬蛋白酶（MMPs）和組織蛋白酶，從而在GBM的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。足細胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30-40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜，即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統(tǒng)的后屏障，對于維持腎小球濾過屏障結構與功能完整性發(fā)揮關鍵作用。
英文名稱 | Mouse Renal Podocyte Cells | 組織來源 | 腎組織 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7253 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：小鼠腎足突細胞
組織來源：腎組織
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠腎足突采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網篩結合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠腎足突經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
人結直腸腺癌細胞;LoVo 大鼠輸尿管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | 核呼吸因子-1抗體 |
TGFB1誘導抗凋亡因子1抗體 | 嘧啶C氧化酶亞基3抗體 |
抗體 | 蛋白質酸酶2調節(jié)亞基3A抗體 |
細胞蛋白Nav1抗體 | 強直性肌營養(yǎng)不良相關蛋白9抗體 |
形成素2抗體（成蛋白） | 脊柱側后凸畸形肽酶抗體 |
PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化) | 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH3 |
RSC96細胞，大鼠雪旺細胞 人肝癌細胞,9204細胞 CL-0136L6(大鼠成肌細胞)5×106cells/瓶×2 | 中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610] |
人小膠質細胞HM | MDA-MB-415(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人星形膠質細胞 | CL-0267CNE-2Z(人鼻咽癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
K562/Adr細胞，人白血病阿耐藥株 小鼠T淋巴細胞,Cl.Ly1+2-/9細胞 前脂肪細胞分化培養(yǎng)基PADM | 小鼠腎足突原代細胞蛋白質酸酶2調節(jié)亞基3A抗體 |
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4] | 小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA 小鼠胎兒真皮成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL |
ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) | 新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE |
食管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 糖代謝相關蛋白1抗體 |
鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶4抗體 | 人外根殼細胞RNAHHORSC miRNA5 μg |
原蛋白轉化酶4抗體 | 鼻咽癌癌基因抗體 |
酪蛋白激酶受體B4抗體 | PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
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