詳細(xì)介紹
小鼠視乳頭星形膠質(zhì)原代細(xì)胞
小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自視乳頭;視乳頭位于黃斑區(qū)鼻側(cè)附近,境界清楚,呈白色、圓盤狀,因此也稱為視盤。視網(wǎng)膜上視覺(jué)纖維在此匯集,并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭中央有一小凹陷區(qū),稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視纖維聚合組成視的起始端,它沒(méi)有視細(xì)胞,因而沒(méi)有視覺(jué),在視野中是生理盲點(diǎn)。視乳頭是開(kāi)角型青光眼早受損的部位,星形膠質(zhì)細(xì)胞是視乳頭處主要的膠質(zhì)細(xì)胞類型,可為視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞無(wú)髓鞘的軸突提供結(jié)構(gòu)和生物支持。青光眼視病變是全球不可逆性致肓眼病。青光眼視病變以視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞軸突喪失并伴有視乳頭處細(xì)胞外基質(zhì)重坦為主要特征。導(dǎo)致視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞喪失的病理生理機(jī)制尚未闡明,膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)調(diào)控元微環(huán)境起多重作用,越來(lái)越多的證據(jù)表明膠質(zhì)細(xì)胞町能對(duì)系統(tǒng)發(fā)育、損傷、修復(fù)及再生起極為關(guān)鍵的作用。視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞胞體多扁平,體積較大,形狀多呈不規(guī)則的多邊形,突起較粗,胞核為橢圓形,核仁清晰可見(jiàn),核周有較密集物質(zhì),胞質(zhì)稀疏,骨架結(jié)構(gòu)良好,明顯不同于長(zhǎng)梭形的成纖維細(xì)胞形態(tài)。
英文名稱 | Mouse Optic Papilla Astrocyte Cells | 組織來(lái)源 | 眼球 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7568 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞
組織來(lái)源:眼球
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠視乳頭星形膠質(zhì)采用-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠視乳頭星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
QSG-7701細(xì)胞,人胚肝細(xì)胞正常 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株,7WPS1細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆); EPO-CHO-T | 核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 |
Thimet內(nèi)肽酶抗體 | 嘧啶c氧化酶亞型2抗體 |
濾泡型轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗體 | 蛋白質(zhì)酸酶2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ抗體 |
細(xì)胞粘附蛋白NGN抗體 | 羥基類固醇(17β)脫氫酶4/17β-HSD4抗體 |
形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子2抗體 | 甲基抗體 |
LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2 |
AD293細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞 牛胚氣管細(xì)胞,EB(NBL-4)細(xì)胞 CL-0303PATU8988(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | A-498(人腎癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-h | 黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2 |
BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1 | 人心肌細(xì)胞cDNAHCM cDNA |
Hs 181.Tes細(xì)胞,正常人細(xì)胞 人癌細(xì)胞,HCC1937細(xì)胞 平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf | 小鼠視乳頭星形膠質(zhì)原代細(xì)胞蛋白質(zhì)酸酶2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ抗體 |
HL-60 人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 | HA Others H15N8 甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
PPP3CA Others Human 人 PPP3CA / 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | CM-R013大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6 | 糖蛋白C抗體 |
鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶1β/CaMKIβ抗體 | 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 |
原鈣粘蛋白12抗體 | 鼻咽癌相關(guān)蛋白6抗體 |
酪蛋白激酶細(xì)胞分裂素抗體 | LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。