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小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-20 12:08:34瀏覽次數(shù):53

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7578 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代軟骨細(xì)胞 SW-13(人上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞) SCaBER 人膀胱鱗癌細(xì)胞 1ml/T75 Caki-1, 人透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Human CHL-Don 中國倉鼠肺成纖維樣細(xì)胞 大鼠原代精原干細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞

方法簡介

公司實驗室分離的小鼠外周血來源內(nèi)皮祖采用采集外周血、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠外周血來源內(nèi)皮祖經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞

組織來源

外周血

英文名稱

Mouse Peripheral   Blood-Derived Endothelial Progenitor Cells

貨號

YS-01X7578

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞
細(xì)胞簡介:

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,亦稱為成血管細(xì)胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點。

培養(yǎng)信息:

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代;不建議多次傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

公司產(chǎn)品:小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞

人支氣管上皮細(xì)胞總RNAHBEpiC NA

肌醇單酸酶IMPA3抗體

節(jié)律蛋白2抗體

鈣反應(yīng)因子抗體

表皮生長因子抗體(人)

小鼠血清白蛋白抗體

抑素B/半蛋白酶抑制劑B抗體

無胸腺癥關(guān)鍵蛋白6樣抗體(迪格奧爾格綜合征)

三號染色體開放閱讀框抗體

二甲基化組蛋白H3抗體

ELK1 Others Human ELK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   (陽性對照)

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素   (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

牛腎細(xì)胞;MDBK(BVDV-free)

CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)( 5×105 ) 人少突膠質(zhì)細(xì)胞 Human

DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CST7 Others Human Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

RAB27B Others Human RAB27B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-H033人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞小鼠血清白蛋白抗體

NCF2 Others Human NCF2 / NCF-2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞 Human

人成纖維細(xì)胞裂解物HMFL

METAP1 Others Human METAP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

RD細(xì)胞,人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 屎腸球菌 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

酸化C端結(jié)合蛋白1抗體

14號染色體開放閱讀框106抗體

IGFBP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體

元衍生孤兒受體1抗體

鋅指蛋白461抗體

ELK1 Others Human ELK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   (陽性對照)

 


操作步驟:

小鼠外周血來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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