化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的小鼠尾動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的小鼠尾動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞 | 組織來源 | 尾動脈 |
英文名稱 | Mouse Tail Artery Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X8536 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠尾動脈內(nèi)皮細胞分離自尾動脈組織；尾動脈是鼠尾的主要血管，尾部主要大血管分布表淺，尾側(cè)靜脈適于注射給藥，尾正中動脈適于動脈采血、練習(xí)顯微外科血管吻合技術(shù)等，實際應(yīng)用相當(dāng)普遍。許多動物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管豐富，供血來源于薦中動脈和臀上動脈兩個動脈，形成尾椎節(jié)段性分布和縱向貫通分布相結(jié)合的特點，尾部淺層 3 套縱向動靜脈系統(tǒng)，鼠尾背側(cè)為不規(guī)則動靜脈鏈狀結(jié)構(gòu)，深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節(jié)脊椎為單位溝通，且呈動靜脈血管徑不匹配的特點。通過研究發(fā)現(xiàn)鼠尾存在兩套血源: 薦中動脈和臀上動脈。其在尾部依尾橫動脈形成溝通。尾橫動脈呈尾椎節(jié)段性分布，直接溝通尾正中動脈、尾深動脈和皮支。在尾部被橫斷后，可以保持損傷節(jié)段以上尾椎的動靜脈回流通路; 鼠尾存在動靜脈口徑明顯不規(guī)范的現(xiàn)象: 尾外側(cè)靜脈明顯大于伴隨的動脈，而正中動脈明顯大于伴隨的靜脈，形成供血主要來自腹面的尾正中動，回血主要依靠兩側(cè)的尾側(cè)靜脈，符合腹面動脈保護的安全性，同時利于血管散熱，尾橫動脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻[王蕾，葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結(jié)構(gòu)與鼠尾的生理功能探討]。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠尾動脈內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
CL-0238U-87 MG(人膠質(zhì)瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | 核孔復(fù)合體蛋白抗體 |
TRIM35蛋白抗體 | 嘧啶p450 2s1抗體 |
貓眼綜合征染色體候選基因1抗體 | 低密度脂蛋白受體抗體 |
營養(yǎng)因子HNT抗體 | 橋粒斑蛋白1+2抗體 |
雄激素結(jié)合蛋白抗體 | 甲羥戊酸脫羧酶抗體 |
MN-h, 小鼠海馬元 | 腎系膜細胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml) |
團頭魴尾鰭細胞;WCF 人卵巢畸胎瘤細胞，PA-1細胞 SK-OV-3(卵巢癌細胞) | 人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1 |
子宮內(nèi)膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 荷蘭黑白花奶牛牛肺細胞;DCL1 |
3T3A31 小鼠胚胎成纖維細胞 | CL-0278HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
HSF細胞，人皮膚成纖維細胞 人癌細胞,MDA-MB-435S細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf | 小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞低密度脂蛋白受體抗體 |
恒河猴腎細胞;MMK2 | CFSC-8B細胞，大鼠肝星形細胞 L-02(正常肝細胞) tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5 |
人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人支氣管上皮細胞系 Human | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1022 |
CL-0107HGC-27(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 糖基轉(zhuǎn)移酶GLT8D2抗體 |
鈣激活鉀通道蛋白KCNT2抗體 | 人胃腺癌細胞;BGC-823 |
原鈣粘蛋白γ10抗體 | 表皮生長因子抗體（大鼠） |
酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗體 | MN-h, 小鼠海馬元 |
化工儀器網(wǎng)