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小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞

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更新時間:2025-05-20 12:16:25瀏覽次數(shù):57

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8536 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代腎動脈平滑肌細胞 U14(小鼠頸癌細胞) CHPS1 花鼠皮膚成纖維樣細胞 1ml/T75 RL95-2, 人內(nèi)膜腺癌細胞系 Human CHO-K1 中國倉鼠細胞亞株 大鼠原代肌腱干細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞

方法簡介

實驗室分離的小鼠尾動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的小鼠尾動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞

組織來源

尾動脈

英文名稱

Mouse Tail Artery   Endothelial Cells

貨號

YS-01X8536

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

小鼠尾動脈內(nèi)皮細胞分離自尾動脈組織;尾動脈是鼠尾的主要血管,尾部主要大血管分布表淺,尾側(cè)靜脈適于注射給藥,尾正中動脈適于動脈采血、練習(xí)顯微外科血管吻合技術(shù)等,實際應(yīng)用相當(dāng)普遍。許多動物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管豐富,供血來源于薦中動脈和臀上動脈兩個動脈,形成尾椎節(jié)段性分布和縱向貫通分布相結(jié)合的特點,尾部淺層 3 套縱向動靜脈系統(tǒng),鼠尾背側(cè)為不規(guī)則動靜脈鏈狀結(jié)構(gòu),深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節(jié)脊椎為單位溝通,且呈動靜脈血管徑不匹配的特點。通過研究發(fā)現(xiàn)鼠尾存在兩套血源: 薦中動脈和臀上動脈。其在尾部依尾橫動脈形成溝通。尾橫動脈呈尾椎節(jié)段性分布,直接溝通尾正中動脈、尾深動脈和皮支。在尾部被橫斷后,可以保持損傷節(jié)段以上尾椎的動靜脈回流通路; 鼠尾存在動靜脈口徑明顯不規(guī)范的現(xiàn)象: 尾外側(cè)靜脈明顯大于伴隨的動脈,而正中動脈明顯大于伴隨的靜脈,形成供血主要來自腹面的尾正中動,回血主要依靠兩側(cè)的尾側(cè)靜脈,符合腹面動脈保護的安全性,同時利于血管散熱,尾橫動脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻[王蕾,葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結(jié)構(gòu)與鼠尾的生理功能探討]。

小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞

培養(yǎng)信息:

小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞

包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGFIGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠尾動脈內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

操作步驟:

小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞


CL-0238U-87 MG(人膠質(zhì)瘤細胞)5×106cells/瓶×2

核孔復(fù)合體蛋白抗體

TRIM35蛋白抗體

嘧啶p450 2s1抗體

貓眼綜合征染色體候選基因1抗體

低密度脂蛋白受體抗體

營養(yǎng)因子HNT抗體

橋粒斑蛋白1+2抗體

雄激素結(jié)合蛋白抗體

甲羥戊酸脫羧酶抗體

MN-h, 小鼠海馬元

腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)

團頭魴尾鰭細胞;WCF 人卵巢畸胎瘤細胞,PA-1細胞 SK-OV-3(卵巢癌細胞)

人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1

子宮內(nèi)膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

荷蘭黑白花奶牛牛肺細胞;DCL1

3T3A31 小鼠胚胎成纖維細胞

CL-0278HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞)5×106cells/瓶×2

HSF細胞,人皮膚成纖維細胞 人癌細胞,MDA-MB-435S細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf

小鼠尾動脈內(nèi)皮原代細胞低密度脂蛋白受體抗體

恒河猴腎細胞;MMK2

CFSC-8B細胞,大鼠肝星形細胞   L-02(正常肝細胞) tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B);F9-CAG-tTA-3E5

人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人支氣管上皮細胞系 Human

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1022

CL-0107HGC-27(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2

糖基轉(zhuǎn)移酶GLT8D2抗體

鈣激活鉀通道蛋白KCNT2抗體

人胃腺癌細胞;BGC-823

原鈣粘蛋白γ10抗體

表皮生長因子抗體(大鼠)

酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗體

MN-h, 小鼠海馬元

 

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