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詳細介紹
小鼠羊膜上皮原代細胞
小鼠羊膜上皮細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結膜組織結構相似，含有眼表上皮細胞，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和營養(yǎng)因子的功能。
英文名稱 | Mouse Amniotic Epithelial Cells | 組織來源 | 胎盤組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7658 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠羊膜上皮細胞
組織來源：胎盤組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠羊膜上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠羊膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
9204細胞，人肝癌細胞 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞,RBL-2H3細胞 山羊腎上皮樣細胞;DG-K1 | 核輸出蛋白5抗體 |
T淋巴細胞易位蛋白2抗體 | 細胞死亡防衛(wèi)蛋白1抗體 |
錨蛋白重復結構域蛋白40抗體 | 電壓門控性鉀通道Kv2.2抗體 |
元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白3抗體 | 親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIB抗體 |
血管壁相連蛋白樣蛋白1抗體 | 甲狀腺激素受體β抗體(THβ1，THβ2) |
MDA-MB-231(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 小鼠成肌細胞;C2C12 |
Lec1細胞，卵巢細胞 人肝癌細胞,FL62891細胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1 |
I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL | IL21 Protein Mouse 重組小鼠 IL21 / Ierleukin 21 蛋白 |
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2C | 人肺間充質(zhì)干細胞cDNAHPMSC cDNA |
CAL 27-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構建穩(wěn)定株)人舌鱗癌細胞 CAL 27-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcinoma DMEM+10% FBS | 小鼠羊膜上皮原代細胞電壓門控性鉀通道Kv2.2抗體 |
綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞;MGC803-GFP | HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1 |
PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | CM-R036大鼠小腸血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL |
人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG] | 特異性鉀離子通道蛋白抗體 |
鈣敏感受體1抗體 | CM-R038大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
原鈣粘附蛋白11X抗體 | 丙氨酰tRNA合成酶2抗體 |
類風濕因子抗體 | MDA-MB-231(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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