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小鼠胰腺星狀原代細胞

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    上海市

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更新時間:2025-05-21 11:07:33瀏覽次數(shù):56

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7070 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
小鼠胰腺星狀原代細胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代滋養(yǎng)層干細胞 人膀胱癌細胞 英文 EJ WCF 團頭魴尾鰭細胞 1ml/T75 HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 COS-7 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的細胞 小鼠原代真皮毛乳頭細胞

詳細介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

小鼠胰腺星狀原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀采用膠原酶制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

小鼠胰腺星狀原代細胞

組織來源

胰腺組織

英文名稱

Mouse Pancreatic   Stellate Cells

貨號

YS-01X7070

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

小鼠胰腺星狀原代細胞
細胞簡介:

小鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細胞,PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達Desmin蛋白,活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,并分別具有特異的標志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的A脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn),原代分離的細胞培養(yǎng)6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學(xué)染色顯示,細胞接種24h仍然表達Desmin,48hDesmin基本不再表達。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細胞開始表達alpha-SMA,隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加,細胞表達alpha-SMA,而不再表達Desmin,說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細胞激活,傳代后細胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型,目前研究發(fā)現(xiàn):胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,導(dǎo)致細胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。

培養(yǎng)信息:

小鼠胰腺星狀原代細胞

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠胰腺星狀原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

小鼠胰腺星狀原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

公司產(chǎn)品:小鼠胰腺星狀原代細胞

DLD-1細胞,人結(jié)直腸腺癌上皮細胞 人視網(wǎng)膜母細胞瘤,Y79細胞 人導(dǎo)管癌細胞;ZR-75-30

核酸外切酶1抗體

T細胞活化連接蛋白抗體

細胞死亡調(diào)解子抗體

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體

電壓門控性鉀通道蛋白亞基kv5.1抗體

元突觸前膜蛋白抗體

親環(huán)蛋白PPIB抗體

血管活性腸肽受體-1抗體

甲狀腺激素受體相互作用13/16E1結(jié)合蛋白抗體

HK-2(人腎小管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠肥大細胞瘤細胞;P815

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 骨髓瘤細胞,P3X63Ag8.653細胞 RN-c細胞,大鼠皮層元細胞

人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC

人髓核細胞RNAHNPC miRNA5 μg

人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C

盤羊皮膚細胞;OAM-S1

成纖維細胞cDNAHMF cDNA

兔角膜前基質(zhì)層成纖維細胞;RCFBF 癌細胞,MCF7細胞 Cl.Ly1+2-/9細胞,小鼠T淋巴細胞

小鼠胰腺星狀原代細胞電壓門控性鉀通道蛋白亞基kv5.1抗體

CL-0219ST(豬細胞)5×106cells/瓶×2

人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2 人小氣道上皮細胞培養(yǎng)基 100mL

CD40 Others Rat 大鼠 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細胞培養(yǎng)基100mL

rCF, 大鼠心臟成纖維細胞   Rattus

天冬蛋白酶ASP4抗體

鈣調(diào)蛋白激酶CaMK1D抗體

MN-s, 小鼠紋狀體元

原鈣粘附蛋白17抗體

酸激酶-M2

類固醇受體復(fù)合物蛋白FKBP5抗體

HK-2(人腎小管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2

 


操作步驟:

小鼠胰腺星狀原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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