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小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-21 11:08:24瀏覽次數(shù):48

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X7736 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代子宮成纖維細(xì)胞 人透明細(xì)胞癌細(xì)胞 英文 ES-2 SCF 白鰱尾鰭細(xì)胞系 1ml/T75 LX-2, 人肝星形細(xì)胞株 VERO 非洲綠猴細(xì)胞 小鼠原代胰腺上皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道壁成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道壁成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞

組織來源

陰道組織

英文名稱

Mouse Vaginal Wall   Fibroblast Cells

貨號(hào)

YS-01X7736

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

細(xì)胞簡介:

小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞分離自陰道組織;陰道位于膀胱、尿道和直腸之間,是一個(gè)富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能,是連接子宮與外陰的通道,是排出月經(jīng)血、娩出嬰兒的必經(jīng)之路,也是一個(gè)重要的性交器官。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層,即黏膜層、肌層和外膜。1)黏膜層由上皮和固有膜組成。上皮較厚,為復(fù)層鱗狀上皮,從基底層到表層由基底層、旁基底層、中間層和表層組成。沒有角化層。陰道粘膜的基底層呈細(xì)波紋狀起伏。2)肌層由平滑肌組織構(gòu)成,肌束排列不規(guī)則,縱行和環(huán)形互相交錯(cuò)。肌束間有較多的結(jié)締組織和彈性纖維。陰道外口有環(huán)形的橫紋肌稱括約肌。3)外膜層為纖維膜,由結(jié)締組織構(gòu)成,內(nèi)含豐富的彈性纖維、靜脈叢、淋巴管和。大鼠陰道壁成纖維細(xì)胞主要分離自外膜層,成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。

小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代左右;2代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

操作步驟:

小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞


人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒cDNAHDF-n cDNA

IQCA1蛋白抗體

酸肌醇0脂酶PLCZ1抗體

1號(hào)染色體開放閱讀框31抗體

轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗體

基質(zhì)金屬蛋白酶2抗體

CD27抗體

二氫嘧啶脫氫酶抗體

E3泛素蛋白連接酶CHIP蛋白抗體

植烷酰A羥化酶2抗體

NA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 氨酸酶   (Neuraminidase / NA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

LIFR Others Mouse 小鼠 LIFR / CD118 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素   (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

AACS Others Human AACS / Acetoacetyl-CoA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

ACVR2B Others Human ACVR2B / ActivinR-IIB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MBL1 Others Rat 大鼠 MBL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0460U14-GFP(小鼠子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠陰道壁成纖維原代細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2抗體

9. 腎臟細(xì)胞系統(tǒng)

MDK Protein Human 重組人 Midkine / MDK 蛋白

人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;UACC812

NOG Others Human Noggin / NOG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

正常小鼠Sertoli細(xì)胞;TM4 小鼠子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

22號(hào)染色體開放閱讀框9抗體

細(xì)胞角膜蛋白多糖抗體

CD81 Others Human CD81 / TAPA-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

去整合素樣金屬蛋白酶20抗體

螺旋環(huán)螺旋蛋白1+2抗體

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10抗體

NA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 氨酸酶   (Neuraminidase / NA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

 

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