詳細(xì)介紹
小鼠脂肪干原代細(xì)胞
小鼠脂肪干細(xì)胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過(guò)程;脂肪組織已由過(guò)去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪干細(xì)胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能的干細(xì)胞,主要恢復(fù)組織細(xì)胞的修復(fù)功能,促進(jìn)細(xì)胞的再生,恢復(fù)年輕面容的同時(shí),身體機(jī)能也得到充分改善,有效改善亞健康、早衰等疾病,由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細(xì)胞具有很多優(yōu)點(diǎn):①具有自我更新及多向分化的潛能;②來(lái)源充足;③對(duì)供區(qū)的創(chuàng)傷較??;④獲得率及體外擴(kuò)增速率高。脂肪干細(xì)胞是目前被廣泛應(yīng)用于組織工程領(lǐng)域中理想的種子細(xì)胞。
英文名稱 | Mouse Adipose Stem Cells | 組織來(lái)源 | 脂肪組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7602 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠脂肪干細(xì)胞
組織來(lái)源:脂肪組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脂肪干采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脂肪干經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒HDF-f | 免疫球蛋白超家族成員9抗體 |
髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體 | 10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框140抗體 |
內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪激酶A抗體(腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白4) | 單核細(xì)胞趨化誘導(dǎo)蛋白1抗體 |
CD2抗體 | 松果體N甲基乙酰羥色胺抗體 |
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框93抗體 | 類白細(xì)胞抗原A抗體 |
CDH15 Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Caki-1(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0046C4-2(人前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1 |
綿羊皮膚細(xì)胞;OAR-S1 | IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
BST1 Others Human 人 CD157 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | CTSS Others Mouse 小鼠 Cathepsin S / CTSS 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Promocell C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基2型套裝 500ml | A9小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 A9 mice subcutaneous connective tissue cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS |
CL-0451SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 小鼠脂肪干原代細(xì)胞單核細(xì)胞趨化誘導(dǎo)蛋白1抗體 |
HGC-27人胃癌細(xì)胞(未分化) HGC-27 human gasic carcinoma cells (undiffereiated) RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS | 人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞cDNAHBdSF cDNA |
CL-0463UM-UC-3(人膀胱移行細(xì)胞癌)5×106cells/瓶×2 | IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
KP-N-NS(人腎上腺母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 破傷風(fēng)桿菌/梭菌Closidium tetani | CD44抗體 |
驅(qū)動(dòng)蛋白KIF5A抗體 | 人羊膜上皮細(xì)胞 雙位點(diǎn)HC-KIT受體細(xì)胞株,DMF7細(xì)胞 BLO-11(小鼠骨骼成纖維細(xì)胞) |
原癌基因AF4蛋白抗體 | 軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子B受體抗體 |
細(xì)胞膜糖蛋白M6b | CDH15 Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。