上海貝博生物科技有限公司

2

18930271235

products

目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質(zhì)生物學(xué)>>蛋白提取和裂解>> BB-31334液體樣本蛋白提取試劑盒（離心管法）

液體樣本蛋白提取試劑盒（離心管法）

返回列表頁

參考價(jià)	面議

參考價(jià)

面議

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

參考價(jià)

面議

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

品牌 貝博生物
型號(hào) BB-31334
廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
所在地 上海市

屬性

$NV_PropertyInfoName.SubString(0,25)

>

在線詢價(jià) 收藏產(chǎn)品加入對(duì)比查看聯(lián)系電話

更新時(shí)間：2025-10-16 16:15:08瀏覽次數(shù)：630評(píng)價(jià)

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!

同類優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品

更多產(chǎn)品

產(chǎn)品分類品牌分類

蛋白質(zhì)生物學(xué)

蛋白表達(dá)

蛋白提取和裂解

細(xì)胞器分離

蛋白純化

蛋白質(zhì)濃縮和緩沖液置換

蛋白定量

蛋白凝膠電泳

免疫組織化學(xué)

全部產(chǎn)品列表

貝博生物

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	50T
貨號(hào)	BB-31334	應(yīng)用領(lǐng)域	生物產(chǎn)業(yè)

總蛋白提取試劑盒含有的配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份，包括細(xì)胞質(zhì)膜、核膜和各種細(xì)胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

詳細(xì)介紹

保存溫度

2-8℃

總蛋白提取試劑盒注意事項(xiàng)

1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

有效期

一年

檢測(cè)方法

WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA等

適用樣本

動(dòng)物細(xì)胞/組織

總蛋白提取試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)

1.使用方便，從細(xì)胞，組織中提取蛋白不需經(jīng)過研磨、反復(fù)凍融、超聲破碎等前處理。
2.提取過程簡(jiǎn)單方便，將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
3.含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
4.紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。
5.總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可結(jié)合釋出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

產(chǎn)品應(yīng)用

WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA等

儀器準(zhǔn)備

1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒

試劑準(zhǔn)備

1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒

耗材準(zhǔn)備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項(xiàng)

?旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。
?蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
?實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。
?蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
?如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
?可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?下游實(shí)驗(yàn)如果是進(jìn)行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測(cè)，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過程保持低溫操作，縮短離心時(shí)間。
?Western Blot實(shí)驗(yàn)內(nèi)參可以選用beta-actin、GAPDH、Tubulin。
離心機(jī)轉(zhuǎn)速有相對(duì)離心力（RCF，×g）和每分鐘轉(zhuǎn)速（RPM，r/min）兩種表示方式，有些離心機(jī)設(shè)置有RPM和×g顯示切換，但部分離心機(jī)沒有自動(dòng)切換功能。需要用下面的公式進(jìn)行換算：g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 為有效離心半徑，即從離心機(jī)軸心到離心收集管底部中心位置的長(zhǎng)度，單位為厘米) 例如: 轉(zhuǎn)速為3000rpm，有效離心半徑為10 cm，則相對(duì)離心力（RCF，×g）為=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。

使用方法

細(xì)胞樣本總蛋白提?。?br />懸浮細(xì)胞蛋白提取：
1. 提取液準(zhǔn)備：
每500 μl冷的總蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物和2 μl磷酸酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取5×106個(gè)細(xì)胞，在4℃，2500×g條件下離心5分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞。
3. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106 -1×107個(gè)細(xì)胞（大約50 mg細(xì)胞/50 μl細(xì)胞沉淀體積）中加入500 μl冷的總蛋白提取液，吹打混勻后，在4℃條件下振蕩20-30分鐘，至細(xì)胞充分裂解，無明顯細(xì)胞沉淀。
5. 在4℃，12000×g條件下離心15分鐘。
6. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到總蛋白。
7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

貼壁細(xì)胞蛋白提取：
1. 提取液準(zhǔn)備：
每500 μl冷的總蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物和2 μl磷酸酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 小心吸取貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)液。
3. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干PBS。
4. 加入適量冷的總蛋白提取液，振蕩15-30分鐘，至細(xì)胞充分裂解，用細(xì)胞刮刀刮一遍，將裂解液吸入另一干凈離心管。
5. 在4℃，12000×g條件下離心15分鐘。
6. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即得到總蛋白。
7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。
組織樣本總蛋白提?。?br />1. 提取液準(zhǔn)備：
每500 μl冷的總蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物和2 μl磷酸酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取50-100 mg組織樣本，用PBS洗干凈，然后用刀盡可能剪碎，加入500 μl總蛋白提取液，用組織勻漿器/勻漿機(jī)勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿吸入一預(yù)冷的干凈離心管中，在4℃條件下振蕩10-20分鐘。
4. 在4℃，10000-14000×g條件下離心15分鐘。
5. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即得到總蛋白。
6. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

常見問題分析

1.蛋白濃度低？
處理部分組織樣本時(shí)可能沒有裂解，導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長(zhǎng)試劑A的處理時(shí)間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

2.細(xì)胞裂解速度慢？
為了充分保證提取得到的蛋白的活性，提取液采用的保護(hù)蛋白的配方，裂解能力溫和，下游應(yīng)用范圍廣。適當(dāng)延長(zhǎng)裂解的時(shí)間即可。

3.用什么方法定量蛋白？
建議用BCA法。不適合用Bradford法，因?yàn)樵噭〢中含有干擾Bradford法的組份，導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。

4.提取時(shí)出現(xiàn)膠狀沉淀？
蛋白提取液處理產(chǎn)物中有時(shí)會(huì)出現(xiàn)少量透明膠狀物，屬正?，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的特定蛋白的情況下，可以直接離心取上清進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)即可；如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理，300w/10秒間隔10秒，超聲3分鐘，隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。檢測(cè)一些常見的轉(zhuǎn)錄因子，例如NF-kappaB、p53等時(shí)，不必進(jìn)行超聲處理。

5.提取的蛋白具有活性嗎？
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，沒有對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。

參考文獻(xiàn)

1.Keyu Luo et al.
Multiple integrin ligands provide a highly adhesive and osteoinductive surface that improves selective cell retention technology
Acta biomaterialia 2019 （IF=6.638）

2.Chang Yu et al.
Targeted iron nanoparticles with platinum-(IV) prodrugs and anti-EZH2 siRNA show great synergy in combating drug resistance in vitro and in vivo
Biomaterials 2018 （IF=10.317）

3.Bing Li et al.
SWATH label-free proteomics analyses revealed the roles of oxidative stress and antioxidant defensing system in sclerotia formation of Polyporus umbellatus
Sci Rep. 2017 （IF=5.228）

4.Yan Li et al.
Tat PTD-Endostatin-RGD: A novel protein with anti-angiogenesis effect in retina via eye drops
Biochimica et Biophysica Acta 2016 （IF=5.083）

5.Jie Li et al.
Sex hormones regulate cerebral drug metabolism via brain miRNAs: down-regulation of brain CYP2D by androgens reduces the analgesic effects of tramadol
British Journal of Pharmacology 2015 （IF=5.259）

6.Pin Huan et al.
Identification of differentially expressed proteins involved in the early larval development of the Pacific oyster Crassostrea gigas
Journal of Proteomics 2012 （IF=5.074）

會(huì)員登錄

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

查看我的收藏夾設(shè)置標(biāo)簽

標(biāo)簽：: 保存成功
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用：

提示

您的留言已提交成功！我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。